生物知识 怎样做好细胞电转染实验? 要想做好细胞的电转染实验,应注意以下几点:1. 选择合适的电场强度合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 siRNA转染效率不理想的原因 siRNA转染效率不理想,常见的原因有:1. RNA与转染试剂比例不佳由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 电转染实验时,DNA有什么要求? 使用Entranster-E电转染试剂进行电转染实验时,应使用高纯度、无菌和无污染的DNA进行电穿孔实验。质粒DNA要求无内毒素,OD值为1.8-2.0。不建议使用... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 提高细胞转染效率的要点 1.组织培养试剂优化细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂,并经可能减少所用试剂的变更。基础培养基—目前所使用的各种市售培养基(如,RPMI 1640和DME... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞转染实验的不同方法 1.DEAE-葡聚糖。这是早在1965年出现的转染方法。带正电的DEAE-葡聚糖或polybrene多聚体可以结合带负电的DNA分子,使得DNA复合物结合在带负电的... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 血清对于细胞转染效率有什么影响? 血清中含有大量的蛋白质,在转染过程中,带负电的蛋白质可能干扰阳离子脂质体对核酸的吸附,影响转染效率。另外,使用脂质体等转染试剂时,由于含血清转染会将血清中的蛋白带入... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 悬浮细胞的siRNA转染实验步骤 悬浮细胞的siRNA转染操作步骤,以24孔板siRNA转染为例1.提前1天细胞种植悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 为什么entranster试剂可以进行有血清细胞转染? 使用脂质体等转染试剂时,由于含血清转染会将血清中的蛋白带入细胞,引发细胞毒性,导致转染效率降低,故不能有血清转染。EntransterTM只浓缩包裹核酸不会将血清带... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 哪些因素会影响细胞转染实验的效率? 1.细胞密度 一般来说,当细胞密度达到60%~80%时进行转染可以取得较高的转染效率,过低或过高都会影响转染效果。2.细胞状态 这点非常关键,很多时候传代次数太... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞转染应该什么时候加抗生素? 细胞转染分为瞬时转染和稳定转染。瞬时转染外源核酸不整合到宿主染色体中,在短时间内在基因或蛋白水平产生较高的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析。... 05月03日 发表评论 阅读全文