生物知识 影响RNA转染的因素 转染试剂转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大小不... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞DNA转染效率影响因素 1.组织培养试剂优化细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂,并经可能减少所用试剂的变更。基础培养基—目前所使用的各种市售培养基(如,RPMI 1640和DME... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞转染实验方法有哪些? 1. 脂质体法。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA,借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。带正电的阳离子脂质体则不同,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电的DNA自动... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 电转染实验,如何设置正确的siRNA实验对照组? 1.设置空白对照组,检验细胞生长状态。2.设置阴性对照组,无血清培养基 + Entranster-E 电转染试剂 + 阴性siRNA。3.设置阳性对照组,无血清培养... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞转染效率重复性差的原因是什么? 转染效率重复性差:1. 细胞融合度不同。保证同样的接种量及同样的时间。2.细菌污染。可使用Entranster试剂,培养基可加抗生素,避免细胞污染。3.细胞传代次数... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 纳米材料转染试剂(Entranster)优势研究 纳米材料转染试剂由纳米高分子聚合物组成,分子内含有许多氨基,在生理PH下会发生质子化,这些质子化的氨基可以中和DNA质粒表面 的负电荷,使DNA分子由伸展结构压缩为... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞转染实验易出现的问题 1.准备不足做细胞转染的时候,在开展正式实验前要多做预试验,优化转染条件。优化转染条件包括:转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。2.... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞RNA转染实验注意事项 1.纯化RNA在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 siRNA转染效率低的原因有哪些? 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞转染实验的建议 1.如为贴壁生长细胞,一般要求在转染前一日,必须应用胰酶处理成单细胞悬液,重新接种于培养皿或瓶,转染当日的细胞密度以70-90%(贴壁细胞)或2×10^6-4×10... 05月03日 发表评论 阅读全文