生物知识 siRNA细胞转染应注意的事项 为了达到高的转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点:1.纯化siRNAsiRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞转染效率低的原因及解决方案 细胞转染是细胞生物学和分子生物学的一种常用的技术手段。而转染效率低下却是实验人员经常遇到的问题,尤其是原代细胞转染,转染难度更大。现分享几个细胞转染实验常见的几个陷... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 成功转染siRNA的主要关键点有什么? 1.设计合成有效的siRNARNAi的核心需要siRNA对相应mRNA进行有效的结合和作用。siRNA的设计合成首先很重要,最优的设计可以用最小的工作浓度取得满意的... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 慢病毒转染贴壁细胞实验方法 1.提前一天细胞铺板提前一天种植细胞,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。感染实验⑴将EnvirusTM-LV用无血... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 PBMC细胞可以用电转染吗 PBMC细胞(外周血单个核细胞)可以通过电转染(electroporation)进行基因转染。然而,由于PBMC细胞包括T细胞、B细胞、单核细胞和NK细胞等多种类型... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 影响RNA转染实验的因素有哪些? 1. 转染试剂转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 如何能够做好siRNA转染实验? 1.纯化siRNAsiRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 RNA细胞转染过程注意事项 1.纯化RNA在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 为什么脂质体细胞转染试剂毒性大? 已有众多的文献报道,脂质体本身会参与细胞生理活动,引起基因表达的上调或下调。如参与PKC(蛋白激酶C)通路调节(Biochemistry.1992 Sep 22;3... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞电转染实验的几点建议 1. 电场强度要合适合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具... 05月03日 发表评论 阅读全文