生物知识 煮沸裂解法小量制备质粒DNA 经Triton X-100、溶菌酶和加热处理可从小量(1~2ml)细菌培养物中分离质粒DNA所获得的质粒则可以用电泳或限制性内功核酸酶消化的方法鉴定;经PEG处理进... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 Plasmid DNA Isolation, Alkaline Lysis(碱裂解法分离质粒DNA) Reagents:Soln 1: 50 mM glucose/10 mM EDTA/25 mM Tris pH 8. Autoclave before use. A... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 碱裂解法制备大肠杆菌质粒(Alkaline Lysis Plasmid Preparation) This protocol yields plasmid DNA that is suitable for restriction digests and clon... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 Preparation of plasmid DNA(质粒制备) Preparation of plasmid DNA : a modified mini alkaline-lysis/PEG precipitation proc... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 质粒载体和外源DNA中限制酶切位点的性质 如今,质粒载体中限制酶切位点的种类极为繁多,因而通常都有可能找到某种带限制酶切位点恰恰与外源DNA片段本身毫无二致的载体。这就具备一个不可比拟的优点,也应是可以用相... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 外源DNA片段和线状质粒载体的连接 外源DNA片段和线状质粒载体的连接,也就是在双链DNA5'磷酸和相邻的3'羟基之间 形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸,... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 质粒载体中平末端片段的克隆 1.分别设立两个反应,用适当的限制性内切核酸酶消化1~10μg质粒DNA和外源DNA片段,使它们能产生平末端。2.苯酚:氯仿抽提与乙醇沉淀法纯化出已被消化的载体和外... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 酵母细胞质粒提取步骤与酵母细胞破壁方法! 酵母细胞质粒提取步骤与酵母细胞破壁方法!酵母细胞的细胞壁比较厚,不容易破壁,不如大肠杆菌的质粒容易提取,最近做了些酿酒酵母的实验,从酿酒酵母中提取质粒,现在就总结下... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 质粒的大量制备 Plasmid Mini and Maxi Prep Methods (Gimila Lab)・ Maxi-preps and all media, solutio... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 质粒的Midi制备 Plasmid Midi-preps (NWSFC)Diatomaceous Earth-based midi-prep. This procedure is th... 05月10日 发表评论 阅读全文