生物知识 TE或水溶的质粒对转染效率的影响 TE(PH8.0): 10 mmol/LTris-Cl,1mmol/L EDTA (pH8.0) DNA磷酸骨架露在外面,因此核酸的外侧有负电聚集;若把 DNA 溶... NEW 04月28日 阅读 被查看19 次 发表评论 阅读全文
生物知识 酵母遗传学方法4:质粒DNA的羟基突变 质粒DNA的羟基突变1. 临用之前制备羟胺溶液,置冰上待用。2. 将用氯化铯纯化的 10 μ g 质粒 DNA 加到含 500 μ l 羟胺溶液的微型离心管。3. ... NEW 04月27日 阅读 被查看25 次 发表评论 阅读全文
生物知识 质粒DNA的提取与纯化 相关专题 一 实验目的 1.掌握质粒 提取的原理及方法。 2.掌握琼脂 糖凝胶电泳的方法。 二 实验原理 根据共价闭合环状的质粒DNA与线性染色体 DN... NEW 04月27日 阅读 被查看37 次 发表评论 阅读全文
生物知识 酵母菌落直接质粒转化法 酵母菌落直接质粒转化法1. 用牙签从平板中挑取单菌落(直径 2 ~ 3mm ),转移到 1.5ml 的无菌离心管中。2. 将 10 μ l 载体 DNA ( 100... NEW 04月26日 阅读 被查看22 次 发表评论 阅读全文
生物知识 重组质粒 质粒具有稳定可靠和操作简便的优点。如果要克隆较小的DNA片段(<10kb)且结构简单,质粒要比其它任何载体都要好。在质粒载体上进行克隆,从原理上说是很简单的,先用限... NEW 04月24日 阅读 被查看56 次 发表评论 阅读全文
生物知识 同一种细胞,不同质粒转染,那G418筛选浓度都一样吗 问:跟文献上的细胞一样,但跟他的质粒不一样,文献上说G418筛选浓度为500mg/ml,那我可以直接用这个浓度筛选我转染以后的浓度吗?质粒的不同对同一细胞的G418... 04月21日 阅读 被查看43 次 发表评论 阅读全文
生物知识 做稳定转染选择何种质粒提取试剂盒 问:我想用纸脂体转染法将质粒稳定转染入肿瘤细胞,请问可以选择哪种试剂盒? 因为我不报销费用,所以想选一种即好用又较为便宜的,请求指点。谢谢答:您的情况我们去年也曾遇... 04月21日 阅读 被查看34 次 发表评论 阅读全文
生物知识 从酵母细胞中分离质粒 一、简介利用一个假定的突变通过互补作用克隆酵母菌基因的一般方法。该突变为cdc101-1,它对酵母菌的生长来说既是隐性的又是温度敏感的。它使酵母可以很正常地在30°... 04月21日 阅读 被查看38 次 发表评论 阅读全文
生物知识 质粒提取中各步离心时离心力怎么确定? 问:请问质粒提取中各步离心时离心力怎么确定?离心力的大小是不是对质粒的提取很重要?谢谢!答:现在提质粒的技术已相对成熟,离心时一般都用12000rpm/min;也有... 04月21日 阅读 被查看58 次 发表评论 阅读全文
生物知识 质粒DNA的小量制备 (一)细菌的收获和裂解1.收获1)将2ml含相应抗生素的LB加入到容量为15ml 并通气良好(不盖紧)的试管中,然后接入一单菌落,于30℃剧烈振摇下培养过夜。 2... 04月18日 阅读 被查看39 次 发表评论 阅读全文