生物知识 原代细胞传代技术 一、贴壁细胞的消化法传代1、吸除或倒掉瓶内旧培养液。2、加入1ml左右消化液(胰蛋白酶或与EDTA混合液)轻轻摇动培养瓶,使瓶底细胞都浸入溶液中。3、消化2-5分钟... 05月06日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞冻存、解冻方法与细胞计数 一、细胞冷冻保存1、材料:生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0.4%(... 05月06日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞单克隆的分离方法 一、有限稀释法材料:a、96孔细胞培养板等;b、HT培养基;c、活力强的杂交瘤细胞;d、小鼠腹腔细胞。方法:a、制备小鼠腹腔细胞。同“细胞融合”一节中的方法。b、制... 05月06日 发表评论 阅读全文
生物知识 原代细胞的培养和维持 一、原代细胞的培养与维持1、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)凡经消化液处理实体组织来源的细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性,细胞接种时浓度要稍大一些,至... 05月06日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞传代培养 一、原理细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也... 05月06日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞冻存和复苏技术 一、原理在不加任何条件下直接冻存细胞时,细胞内和外环境中的水都会形成冰晶,能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等,能引起细胞死... 05月06日 发表评论 阅读全文
生物知识 胰酶使用注意及贴壁细胞的消化 胰酶使用注意:1、在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。2、胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。贴壁细胞的消化:... 05月06日 发表评论 阅读全文
生物知识 如何把细胞养的更漂亮? 有经验和刚刚从事细胞培养工作的人员都应该认真仔细地询问下细胞提供方提供的建议,提前了解所要培养细胞的详细资料,准备好细胞所要用到的培养基和相关试剂,虽然所有的贴壁,... 05月06日 发表评论 阅读全文
生物知识 原代细胞冻存技术 原代细胞冻存技术:1、选用生长情况好,数量较多的原代细胞,冻存前一天换液一次。2、贴壁细胞需用0.25%胰酶常规消化将细胞消化下来,将细胞悬液收集至离心管中。3、1... 05月06日 发表评论 阅读全文
生物知识 原代细胞分离和培养基本步骤 原代细胞分离和培养基本步骤1、器官和组织的选择尽可能的去除不必要的组织和血迹。2、原代细胞的分离(1)应用PriCells原代细胞分离试剂盒I、II、III。(2)... 05月06日 发表评论 阅读全文