生物知识 原代细胞的培养方法 1、组织块培养法(1)按照前述方法取材,将组织剪成或切成1mm 3 大小的小块,并加入少许培养基使组织湿润。(2)将小块均匀涂布于瓶壁,每小块间距0.2 cm~0.... 05月07日 发表评论 阅读全文
生物知识 Hela细胞传代步骤 1.观察培养基是否正常,细胞状态如何,细胞密度如何,决定是否传代。观察时拧紧盖子。2.加热PBS、versene、培养基,(提前做好) 瓶子不要倒着放,不要让液体接... 05月07日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞直接计数 1、如果靶细胞是帖壁细胞,在细胞因子作用适当时间后,用生理盐水洗去死亡细胞,用0.25%胰蛋白酶液消化细胞。加适量生理盐水吹打,使细胞分散成单个细胞。直接在血细胞计... 05月07日 发表评论 阅读全文
生物知识 原代细胞染色技术 一.台盼蓝染色(1)制备单个细胞悬液,并作适当稀释(106 细胞/ml)。(2)染色:取9滴细胞悬液移入小试管中,加一滴0.4%台盼蓝溶液,混匀。(3)计数:在3分... 05月07日 发表评论 阅读全文
生物知识 293T细胞的培养心得 293T细胞差点被我养死,幸好我又将它起死回生,一点心得。细胞传代:当细胞在细胞培养瓶内长满达到80%时就要传代,一传二,24小时后再传代。48小时传就不好了,如果... 05月07日 发表评论 阅读全文
生物知识 293T细胞的培养与传代 293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系,293T细胞由293细胞派生,同时表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。大家注意2... 05月07日 发表评论 阅读全文
生物知识 原代细胞的培养与建系(二) ③酶的浓度 胰蛋白酶一般采用的浓度为0.1%-0.25%(活力1:200或1:250),但遇到难消化的组织时,浓度可适当提高,消化时间适当延长。浓度高对细胞有毒性,... 05月07日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞消化的个人经验 一、酶消化法1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单... 05月07日 发表评论 阅读全文
生物知识 HePG2细胞和L-02细胞的传代经验 HePG2细胞属人肝肿瘤的恒生细胞株,L-02细胞则是人胎肝细胞株,二者所使用的培养基可以是一样的,即最常见的DMEM。一干使用低糖的。细胞长满培养瓶时既要传代。使... 05月07日 发表评论 阅读全文
生物知识 Jurkat细胞(人外周血白血病T细胞)的传代 Jurkat细胞(人外周血白血病T细胞),是一种悬浮细胞。我的经验如下:1、培养液:RPMI1640,15%小牛血清,2%Na2CO3,1%HEPES,青霉素100... 05月07日 发表评论 阅读全文