石蜡切片免疫组化步骤及所需生化试剂列表

下面详细介绍实验步骤:

第一步:石蜡切片置于67℃烘箱中,烘片2小时,脱蜡至水,用pH7.4的PBS冲洗三次,每次3分钟(3×3’)。

第二步:取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液,加入微波盒中,微波加热至沸腾,将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上,放入已沸腾的缓冲液中,中档微波处理10分钟,取出微波盒流水自然泠却,从缓冲液中取出玻片,先用蒸馏水冲洗两次,之后用PBS冲洗2×3’。(注:不是所有的抗体都需要微波修复的,视具体情况而定)

第三步:每张切片加1滴3%H2O2,室温下孵育10分钟,以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗3×3’。

在此免疫组化实验中可能需要用的试剂及仪器耗材包括:PBS、柠檬酸盐缓冲液、蒸馏水、增强剂、酶标抗鼠、兔聚合物、苏木素、酒精、二甲苯、树胶、盐酸、二氨基联苯胺。

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