弃原培养基
D-Hanks洗一到两次(减少血清对胰酶消化作用的干扰)
0.250%胰酶消化
倒置相差显微镜下观察,细胞变圆、收缩突起时以血清终止消化(如含EDTA可以在此时吸出消化液,注意掌握时机,否则会将细胞也一同吸走)
加入适量DMEM,小心吹打,镜下观察细胞都已消化下来,加DMEM至终体积-->转移细胞至其它培养瓶或皿。
经验教训:以前我们配的消化液含有EDTA,但最终没有吸出来,传代后细胞长势一直不佳,换了0.250%的胰酶后上述问题没有了。
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