人正常前列腺基质永生化细胞(WPMY-1)

人正常前列腺基质永生化细胞(WPMY-1)介绍

通过一个pRSTV质料结构，用SV40大T抗原对基质细胞进行永生化。肌成纤维基质细胞株，人正常前列腺基质永生化细胞(WPMY-1)与RWPE-1细胞一样，来源于同一张成人前列腺组织切片的周围区域的基质细胞。

人正常前列腺基质永生化细胞(WPMY-1)特性：

1）来源：前列腺

2）形态：成肌细胞，贴壁生长

3）含量：>1x106个/mL

4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

细胞接受后的处理：

1）收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。

2）请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

3）弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的完全培养基。

4）如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。

5）接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。

人正常前列腺基质永生化细胞(WPMY-1)用途：仅供科研使用。

明舟生物（mingzhoubio）细胞培养操作规程，供参考

一．人正常前列腺基质永生化细胞(WPMY-1)培养基及培养冻存条件准备：

1）准备DMEM培养基(DMEM，GIBCO，货号11995-065)，95%；优质胎牛血清，5%。

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。

3.轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养液后吹匀。

4.移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，先要消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的1-3步骤进行，最后的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心，用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。