人胎盘绒毛癌细胞
1、细胞名称：JAR；人胎盘绒毛癌细胞2、生长特性： 悬浮3、细胞生长条件：培养条件 1640+10%FBS+1%P/S温度 37℃空气条件 5% CO2,95% AIR传代方法 建议 1:2 传代，2~3 天换液冻存条件 90%FBS+10%DMSO4、背景资料：AR细胞株来源于胎盘滋养层肿瘤。二．使用方法1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：取出 25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 细胞培养箱中静置 3-4 小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。2、细胞传代：1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后 将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；3）弃上清，沉淀细胞用 12ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。3、细胞冻存：1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将 悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h 后转 入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。4、细胞复苏： 1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入 37℃ 水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁； 2）将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；3）弃上清，沉淀用 5ml 完全培养基重悬，接种 25cm2培养瓶，于 37℃， 5%CO2细胞培养箱中培养；4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
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