人视网膜神经胶质瘤细胞（WERI-RB-1）

人视网膜神经胶质瘤细胞（WERI-RB-1）介绍：人视网膜神经胶质瘤细胞（WERI-RB-1）介是1974年R.M. McFall和T.W. Sery建立的两株人眼癌细胞系中的一株。细胞能在Difco Bacto-Agar中存活但不形成克隆。扫描电镜显示在表面囊泡，板状伪足和微绒毛在数量上和频率上的改变。细胞分化研究，肿瘤治疗的动物模型和生化评价都涉及这株细胞。

人视网膜神经胶质瘤细胞（WERI-RB-1）介特性：

1）来源：视网膜

2）形态：圆形细胞聚集成葡萄状，悬浮生长

3）含量：>1x106

4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

运输和保存

1）使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。

2）收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基后转移至T25培养瓶中培养，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

3）收到细胞后请拍照，3天内如果发现污染，请及时拍照与我们联系。

人视网膜神经胶质瘤细胞（WERI-RB-1）用途：仅供科研使用。

细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。

2）请先在显微镜下确认细胞生长状态，酒精消毒瓶壁并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

3）将T25瓶中的细胞培养基离心后，去上清，添加6ml完全培养基，加入新的T25瓶中继续培养。

4)如果细胞长满80%请及时进行细胞传代.

5）接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。

人视网膜神经胶质瘤细胞（WERI-RB-1）培养步骤

一．人视网膜神经胶质瘤细胞（WERI-RB-1）培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%，即可进行传代培养。

注：第一次传代推荐传代比例为1:2，以后传代比例可根据客户需要自己决定。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。

下面T25瓶为类；

1，细胞冻存时，取上清，可使用血球计数板计数。

2，4min，1000rpm离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度1-2xE6/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。

3，将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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