人Ph+急淋白血病细胞系
1、细胞名称：Sup-b15;人Ph+急淋白血病细胞2、生长特性： 悬浮3、人Ph+急淋白血病细胞生长条件：培养条件 IMDM+20%FBS+1%P/S温度 37℃空气条件 5% CO2，,95% AIR传代方法 首次建议1:2传代，2~3天换液冻存条件 90%FBS+10%DMSO二．人Ph+急淋白血病细胞使用方法1、您收到人Ph+急淋白血病细胞后，请按照以下方法进行操作：取出细胞培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态，然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。2、人Ph+急淋白血病细胞传代：待人Ph+急淋白血病细胞达到一定密度（不超过1x10^6/ml）可按照以下方法换液培养或传代。方法①：收集细胞，1000rpm离心5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。方法②：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。贴壁细胞需要用胰酶进行消化。3、人Ph+急淋白血病细胞冻存：1）将细胞悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；2）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；3）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。4、人Ph+急淋白血病细胞复苏：1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；2）将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中， 1000rpm离心5min；3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。注：培养瓶内非完全培养基，请务必使用准备好的新鲜培养基。悬浮细胞运输中会有少些细胞因为碰撞裂解产生碎片，收到细胞如碎片较多时，胎牛血清可以用15%培养三天，利于细胞尽快恢复状态，细胞稳定后再调回10%即可。
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