人B 淋巴细胞瘤细胞(RAMOS)

人B 淋巴细胞瘤细胞(RAMOS)

B淋巴细胞瘤细胞(RAMOS)介绍:B淋巴细胞瘤细胞(RAMOS)来源于一位3岁的白人Burkitt淋巴瘤患者;EBV阴性;表达IL-4受体和低亲和性IgE受体(CD23);分泌IgMlamda L);表达膜型和分泌型的免疫球蛋白。

B淋巴细胞瘤细胞(RAMOS)特性

1) 来源:血液

2) 形态:淋巴母细胞样,悬浮生长

3) 含量:>1x106/mL

4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

细胞接受后的处理:

1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。

2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h

3)弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的完全培养基。

4)如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代,传代培养用6ml明舟生物(mingzhoubio)附带的完全培养基。

5)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。

B淋巴细胞瘤细胞(RAMOS)用途:仅供科研使用。

明舟生物(mingzhoubio)的B淋巴细胞瘤细胞(RAMOS)培养操作规程,供参考

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640GIBCO,货号11875085),90%;胎牛血清,10%

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃,培养箱湿度70%-80%

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

二.细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1215的比例分到新的含8ml养基的新皿中或者瓶中。

方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1213的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。

注意事项:

1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

2.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

内容来源:生物资料网,如果侵权麻烦联系网站工作人员删除!

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