在分子生物学研究中,准确、高效地检测和定量RNA分子是至关重要的。随着技术的发展,逆转录定量PCR(RT-qPCR)已成为研究基因表达、病毒载量和RNA干扰效果的金标准技术。本文将详细介绍一种新型的RT-qPCR试剂——qScript XLT One-Step RT-qPCR ToughMix ROX,它以其高灵敏度、高特异性和操作简便性在分子生物学领域引起了广泛关注。
应用领域
基因表达分析:RT-qPCR是研究基因表达模式和调控机制的常用工具,可以帮助科学家理解不同条件下基因表达的变化。
病毒载量测定:在传染病研究中,RT-qPCR用于定量病毒RNA,从而评估病毒载量和感染进程。
RNA干扰(RNAi)效果评估:通过RT-qPCR可以评估RNAi技术对特定基因表达的抑制效果。
疾病诊断和预后:在临床诊断中,RT-qPCR可以用于检测特定的疾病相关基因表达,有助于疾病的早期诊断和预后评估。
药物开发和筛选:在药物开发过程中,RT-qPCR可以帮助评估药物对基因表达的影响,从而筛选出潜在的有效药物。
qScript XLT One-Step RT-qPCR ToughMix ROX简介
链接:
https://www.quantabio.com/product/qscript-xlt-1-step-rt-qpcr-toughmix/
qScript? XLT One-Step RT-qPCR ToughMix, ROX?, QuantaBio
货号:95133
95133-100 100R
95133-500 500R
95133-02K 2000R
qScript XLT One-Step RT-qPCR ToughMix ROX是一种即用型、高灵敏度的RT-qPCR主混合试剂,适用于使用TaqMan 5’-水解探针等杂交探针检测化学方法的实时PCR系统,且不需要被动参考染料。该试剂允许在不打开试管的情况下,在同一管中进行第一链cDNA合成和PCR扩增。
该试剂特别适用于高灵敏度定量RNA病毒或低丰度RNA靶标,以及高通量基因表达研究。系统经过优化,能够在减少的反应体积和快速循环时间内提供最大的RT-PCR效率、灵敏度和特异性。
组成成分
qScript XLT One-Step RT-qPCR ToughMix包含除了RNA模板和探针之外的所有RT-qPCR所需成分,并且与所有双标记探针化学兼容。
qScript XLT One-Step RT-qPCR ToughMix ROX(2X)包含2X反应缓冲液,含有dATP、dCTP、dGTP、dTTP、氯化镁、qScript XLT逆转录酶、RNase抑制蛋白、热启动DNA聚合酶、AccuVue蓝色qPCR染料、ROX和稳定剂。
逆转录酶的特性
qScript XLT是一种经过工程改造的M-MLV逆转录酶,具有降低的RNase H活性和在更高温度下改善的活性和稳定性。在50至55°C的较高温度下进行一步RT-qPCR的第一链步骤,可以提高引物退火的特异性,并破坏可能干扰cDNA合成的RNA二级结构。
高抗PCR抑制剂能力
ToughMix的一个关键成分是一种超纯、高度进程性的热稳定DNA聚合酶,与高亲和力单克隆抗体结合。这提供了一个极其严格的自动热启动,最小化引物二聚体和其他非特异性PCR伪影的可能性。AccuVue?示踪染料的浅蓝色简化了在白色或透明板中的反应组装,并有助于最小化移液或混合错误。它不会干扰qPCR性能或影响产品的稳定性。
实时PCR仪器兼容性
qScript XLT One-Step RT-qPCR ToughMix ROX与多种实时PCR仪器兼容,包括但不限于:
- Applied Biosystems 5700
- Applied Biosystems 7000
- Applied Biosystems 7300
- Applied Biosystems 7700
- Applied Biosystems 7900
- Applied Biosystems 7900HT
- Applied Biosystems 7900 HT Fast
- Applied Biosystems StepOne
- Applied Biosystems StepOnePlus
储存和稳定性
qScript XLT One-Step RT-qPCR ToughMix ROX在-20°C的恒温冷冻室中避光保存时,稳定性可达一年。反复冻融不会影响RT-qPCR性能。
qScript XLT One-Step RT-qPCR ToughMix ROX作为一种新型的RT-qPCR试剂,以其高灵敏度、高特异性和操作简便性,在分子生物学研究中具有广泛的应用前景。无论是在基础研究还是在临床诊断中,它都能提供可靠的数据支持,是科研人员和临床工作者的重要工具。
本产品仅供研究使用。不适用于任何动物或人类的治疗或诊断用途。