1min轻松get全套蛋白提取及定量解决方案

蛋白质是包括人类在内的各种生物有机体的重要组成成分，是生命的物质基础之一。生物体的生长、发育、遗传和繁殖等一切生命活动都离不开蛋白质。研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的蛋白。因此，选择高质量的蛋白提取及定量试剂盒是蛋白质研究的重要基础和关键之一。

蛋白提取

蛋白质种类很多，在理化特性方面差异较大，因此不可能有一个固定的程序适用各类蛋白质的分离。动物细胞是由细胞膜、细胞质和细胞核三部分组成的，蛋白质在细胞膜、细胞质和细胞核内均大量存在，发挥着不同的生理功能。植物细胞由于存在细胞壁的结构，因此比动物细胞蛋白的提取相对复杂。蛋白提取是免疫学/细胞学实验的起点。艾美捷可提供系列蛋白提取产品包括总蛋白提取、总膜蛋白提取、胞浆蛋白提取、细胞核蛋白提取等，分离的蛋白可以用于多种下游的功能研究，比如转录调控、信号转导、酶活分析等。

蛋白定量

蛋白提取后紧接着就是蛋白定量，精确的蛋白质定量是蛋白质相关实验所必需的。目前最常用的两种蛋白质定量方法包括BCA法、Bradford（考马斯亮蓝）法：

BCA法原理：碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，吸光强度与蛋白浓度成正比。测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。

Bradford法原理：考马斯亮蓝在酸性游离状态下呈棕红色，最大光吸收在465nm，当它与蛋白质结合后变为蓝色，最大光吸收在595nm。在一定的浓度范围内，蛋白质-染料复合物在波长为595nm处的光吸收与蛋白质含量成正比，通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。

BCA法与Bradford法应如何选择？

这主要由样本中的干扰物质决定。如果你的蛋白抽提试剂中含有大量去垢剂且不含有螯合剂、还原剂时，可使用BCA法；如果你的蛋白里含有EDTA等金属螯合剂或者含有还原型物质，且不含有去垢剂时，可使用Bradford法。

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