northern blot实验作用和原理

orthern blot是一种用于检测RNA的分子生物学技术,与Southern blot(用于检测DNA)和Western blot(用于检测蛋白质)等技术类似。Northern blot通常用于检测RNA是否存在、其大小和数量,并可定性和定量研究RNA的表达模式和调控机制。以下是northern blot的主要作用和原理

1. 主要作用

Northern blot可以确定RNA是否在一个样品中存在,并帮助确定RNA的含量。它可以帮助检测低水平表达的RNA,从而了解RNA在某个组织或细胞类型中的表达情况。

Northern blot可以区分不同的RNA亚型,例如小RNA和长RNA,mRNA和非编码RNA等。通过使用DNA探针,可以鉴别与这些RNA序列特异结合的探针,以进一步确定RNA亚型的存在。

Northen blot可以定量RNA表达水平,可以根据信号强度比较不同样品之间同种RNA的表达水平。此外,组织和发育上的差异可以通过对不同来源RNA的表达进行比较来研究。

2. 原理

从样品中提取RNA后,通过琼脂糖凝胶电泳将RNA分离成不同的大小,然后将RNA转移到固体支持介质例如尼龙或硝酸纤维素膜上。通过使用标记有互补序列(probe)的单链DNA或RNA来特异性识别Ladder以及样本RNA而不与其他RNA结合,并且其中的放射性或非放射性等探针可以较敏感地检测到RNA的存在。

如果特异序列为金属离子或biotin识别基元,则可使用针对其的抗体或联合化学发光技术来检测RNA。通常,northern blot信息是通过比较参考RNA和目标RNA的信号强度来解释的,可以通过量化该相对强度来获得RNA表达水平的定量数据。

内容来源:生物资料网,如果侵权麻烦联系网站工作人员删除!

艾美捷科技优势代理品牌

发表评论

:?: :razz: :sad: :evil: :!: :smile: :oops: :grin: :eek: :shock: :???: :cool: :lol: :mad: :twisted: :roll: :wink: :idea: :arrow: :neutral: :cry: :mrgreen: