Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存管是封闭的真空塑料管,用于在储存和运输过程中收集和保存人类全血样品中的 cf-DNA、循环肿瘤 DNA、cf-RNA 和循环肿瘤细胞。将这些试管与 Norgen 的血浆/血清游离循环 DNA 纯化试剂盒或 Norgen 的血浆/血清 RNA 纯化试剂盒结合使用,可以在非常小的洗脱体积中纯化和浓缩不含抑制剂的 cf-DNA/ct-DNA/cf-RNA。从 Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存管中回收的血浆也与任何其他 cf-DNA 和/或 cf-RNA 纯化方法兼容。纯化的 cf-DNA、ct-DNA 和 cf-RNA 与任何下游应用分析兼容,包括 PCR、qPCR、rt-qPCR、甲基化敏感 PCR、Southern Blot 分析、基因表达分析、微阵列和 NGS。
艾美捷科技作为Norgen Biotek品牌的独家代理为您提供cf-DNA/cf-RNA 保存管,其属于一种单管,同时保存和分离 cf-DNA 和 cf-RNA,查看下方信息:
产品名称 | 货号 | 规格 |
cf-DNA/cf-RNA Preservative Tubes |
Dx63950 63950 |
50Tubes |
cf-DNA/cf-RNA 保存管特色和优势
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无固走剂保存,不发生 DNA 交联
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在常温下保存 cf-DNA/ct-DNA 和 cf-RNA 可达 30 天,在 37°C下可保存至多 8天
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在常温下保存循环肿瘤细胞(CTCS)14天
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运输后无血浆体积损失
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防止溶血,以便更好地分离血浆
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防止血细胞凋亡和基因组 DNA 片段化
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生产高质量/数量的血浆 cf-DNA/ct-DNA/cf-RNA
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使用本试剂盒进行血浆分离的程序符合1SO20986-3:2019标准
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提供 CE-IVDR 格式
保存 cf-DNA/ct-DNA 和 cf-RNA 的性能
从 Norgen 保存的血液中获取,高质量的 cf-DNA
图1.使用 Norgen 的 c-f-DNA/cf-RNA 保存管从血浆中保存的 cf-DNA 数量高。
来自同一供体的血液样本被分别采集到竞争者试管或 Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存管中,并在室温下储存7天。Norgen 的 cf-DNA/Cf-RNA 保存管回收了 6.5 mL血浆,而竞争者的试管回收了 3.5 mL 血浆,然后使用 Norgen 的血浆/血清无细胞循环 DNA 提取中套件(货号 55600)和 Norgen 的血浆/血清无纴胞循环 DNA 提取大套件(货号 55800)从每个试管回收的整个血浆体积中分离 cf-DNA,使用Agilent 生物分析仪高灵敏度 DNA 芯片评估从两个样本中回收的 DNA 数量,从生物分析仪的追踪图中可以看出,与从竞争者的保存管中回收的 cf-DNA相比,Norgen 的保存管产生了更多的 cf-DNA(蓝色峰宜)
在高温运输温度(37°C)下稳定
图2.高温(37°C)储存8天的影响,血液样本被分别采集到 EDTA 试管。
竞争者试管或 Norgen 的 cf-DNA/Cf-RNA 保存管中,并在 37°℃ 下储存,然后从处理过的血浆中分离 cf-DNA。通过卖时 PCR 使用长 ALU 基因靶标(247 bp)测定 gDNA 浓度,EDTA 试管中的 gDNA 靶标在 37°℃ 储存1天后 Ct 值显著下降,与初始时间点相比,并持续下降至储存的第 8天。对于竞争者,gDNA 靶标在储存的前4天内保持稳定,然后 Ct值开始显著下降,表明在第4天后稳定性较差。Norgen 的 cf-DNAVcf-RNA 保存管使样本稳定了8天
防止溶血
图 3.随时间测量收集的血液溶血情况。血液样本被分别采集到:1)EDTA 管;2)竞争者试管;3)Norgen 的 ef-DNA/ef-RNA 保存管中,并储存长达 30 天
通过在 414nm 处测量3名受试者血浆中游离血红蛋白的吸收量来确定港血情况,图中显示了平均吸收量,在 EDTA 管和竞争者试管中,随着每增加一天的储存时间,游离血红蛋白的量迅速增加,并在Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存管中保持相对恒定:
防止运输/运输过程中 9DNA 释放到血浆中
图 4.防止细胞裂解以及 gDNA 的释放和凋亡梯在血浆中的积累
血液样本被分别采集到三种不同的试管中(Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存管、EDTA 和竞争者试管)并储存长达 30 天。Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存管有助于防止高分子量的 gDNA 释放到血浆中,同时最小化来自死亡的外周血白细胞的污染性凋亡梯的积累。如图所示,与竞争者和 EDTA 管相比,gDNA 污染水平非常低。这表明细胞裂解水平非常低,随后释放到保存的血浆样本中的 gDNA也很少。
cf-DNA 在室温下稳定30天
图5.空温储存对 。f-DNA(PDNA,以短 Alu(115bp)片段为例)和基因组DNA(gDNA,以大Alu(247 bp)片段为例)的影响.
血液样本被分别采集到:1)EDTA管,2)竞争者试管或3)Norgen的cf-DNA/Cf-RNA 保存管中,并在室温下储存,在指定时间点取出血液样本并分离血浆,分离出 DNA,并使用短的 ALU 基因靶标(115bp,代表pDNA)和长的 ALU 基因(247 bp,代表 gDNA)通过实时 PCR 测定 pDNA 和 gDNA 浓度,这两个片段的水平在指示稳定化且无溶血的时间内应保持不变,正如预期的那样,在 EDTA 管中没有 cf-DNA 的稳定化和广泛的溶血,竞争者在 14 天后两个基因的 Ct 值显著降低,而 Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存管在室温下稳定了 30 天。
cf-RNA 在室温下稳定30天
图 6.空温储存对 ef-RNA 的影响,以 18S rRNA 转录本、HPRT1 mRNA 转录本和miR-21 为例.
血液样本被分别采集到:1)竞争者试管或2)Norgen的cf-DNA/cf-RNA 保存管中。竟争者试管在室温下储存 14 天,而 Norgen 的 cf-DNAVcf-RNA 保存管在室温下储存 30 天,在指定时间点处理每个试管并分离血浆。分高出 cf-RNA,并通过针对185 rRNA 转录本、HPRT1 mRNA 转录本和 miR-21 的 rt-gPCR 扩增测定纯化 cf-RNA 的稳定性。这三个靶标水平在指示稳定化的时间内应保持不变,竞争者在7天后三个靶标的 Ct 值显著升高,表明 cf-RNA 降解,而 Norgen 的 cf-DNA/cf-RNA 保存管在室温下稳定了 30 天。
运输后,最大化保留血浆体积
在运输或转运过程中,血浆体积没有损失。
血液样本来自六位不同的供体,以双重方式采集。一组样本在实验室中保持室温,另一组则被放置在保温箱中,并通过隔夜空运从安大略省的家罗德运往导尼托巴名的温尼伯,然后返回案罗德(总耗时72小时)。返回后,保存的样本在室温下储存7天,然后分离血浆。
从 Norgen 的 cf-DNA/CF-RNA 保存管中回收的血浆体积在运输前后没有变化(回收血浆6-7mL)。对于竞争者试管和EDTA 试管,运输前回收的血浆体积约为4mL,运输后约为2.5 ml。
部分文献发表:
Title:Preanalytical, analytical and postanalytical considerations in circulating microRNAs measurement. Citation:Biochemia Medica 2024. Authors:Mustapha Zendjabil
Title Cell-Free DNA as a Biomarker in a Rodent Model of Chlorpyrifos Poisoning Causing Mitochondrial Dysfunction. Citation:Journal of Medical Toxicology 2023.
Early Detection of Lung Cancer Using Small RNAs. Citation | SCREENING/EARLY DETECTION 2023.
Title:Potential of circulating tumour DNA as a biomarker in liquid biopsy. Citation Biotechnology & Biotechnological Equipment 2023.