简介

从健康母牛体内刚挤出的牛奶，含有少量的正常起始微生物。但将牛奶装入未消毒的器具和在分装、运输过程中，会被很多其他微生物甚至致病菌污染，而且牛乳含有丰富的营养物质（糖类、蛋白质、脂肪、无机盐和维生素等），在其中的微生物会很快繁殖，因此，一份牛乳样品的细菌含量可反映母牛的健康状况和牛乳生产与保藏的条件。

牛乳的细菌学检査方法有下列三种：1. 显微镜直接计数法——涂片面积与视野面积之比估算法；2. 美蓝还原酶试验法；3. 标准平板计数法。

来源：《微生物学实验（第三版）》

操作方法

美蓝还原试验法

原理

美蓝还原酶（methylene blue reductase）试验法是用于测定牛乳质量的一种定性检测法，操作简便，不需特殊设备。该法中用的美蓝是一种氧化还原作用指示剂，在厌氧环境中，它将被还原成无色。如果牛乳中有细菌生长繁殖，必将造成其中溶解氧的酼少，牛乳样品中的氧化-还原电势降低. 通过加入其中的美蓝颜色变化的速度，可鉴定该牛乳的质量. 其标准规定为：1. 在 30 min 内美蓝被还原成无色的样品为「很差」；2. 在 30 min 至 2 h 之间被还原者，为「差质量」；在 2～6 h 之间被还原者，为「尚好」或「中等」；4. 在 6～8 h 之间被还原者，为「好质量」。

材料与仪器

生牛乳 10 ml 质差生牛乳 10 ml美蓝溶液（1:250 000）灭灭菌试管水浴锅

步骤

1. 标记 2 个无菌试管 1 和 2。

2. 分别向 2 个试管加入 10 ml 生鲜牛乳样品和质差牛乳样品。

3. 分别向两管各加入 1 ml 美蓝溶液，盖紧管塞。

4. 轻轻倒转试管约 4 次，置 37℃ 水浴中，并记录培养时间。

5. 测试管在水浴中稳定 5 min 后，取出，轻轻倒转一次后再放回水浴中。

6. 每隔 30 min 现察记录试管中美蓝颜色的变化，直至 3～6 h。

注意事项

常见问题

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