至今，还没有一种固定化方法可以普遍地适用于每一种酶，特定的酶要根据具体的应用目的选择特定的固定化方法。已建立的固定化方法，大致可分为三类：载体结合法（包括物理吸附。离子结合法、鳌合法。共价结合法），交联法和包埋法（包括聚合物包埋法、疏水相互作用、微胶囊、脂质体包埋）。
载体结合法：
（1）物理吸附法: 是制备固定化酶最早采用的方法，它足以同体表面物理吸附为依据，使酶一水不溶性载体相接触而达到酶吸附的目的。 （2）鳌合法 :这是一种比较吸引人的技术，它主要是利用螫合作用将酶直接赘合到表面含过渡金属化合物的载体上，具有较高的操作稳定性。 （3）共价结合法: 共价结合法是通过酶分子上的功能团，与载体表面上的反应基团发生化学反应形成共价键的一种固定化方法，是研究得最多的固定化方法之一。
共价交联法: 共价交联法是通过双功能或多功能试剂，在酶分子间或酶分一产和载体间形成共价键的连接方法。这些具有两种相同或不同功能基团的试剂叫做交联剂。常见的交联剂有顺丁烯二酸配和乙烯共聚物、戊二醛等，其中以戊二醛最为常用。
包埋法: 将酶包埋在高聚物凝胶网格中或高分于半透膜内的固定方法；前者又称为凝胶包埋法，后者则称为微囊法。包埋法一般不需要与酶蛋白的氨基酸残基起结合反应，较少改变酶的高级结构，酶的回收率较高；但它仅适用于小分于底物和产物的酶，因为只有小分子物质才能扩散进人高分子凝胶的网格，并且这种扩散阻力还会导致固定化酶动力学行为的改变和活力的降低。微囊法是利用各类型的膜将酶封闭起来，这类膜能使低分子产物和底物通过，而酶和其他高分于物质不能通过。纤维包埋法是将酶包埋在合成纤维的微孔穴中的方法，其优点是成本低、可用于酶结合的表面积大。有优良的抗微生物和抗化学试剂的性能，最常用的聚合物是醋酸纤维素。
(责任编辑：大汉昆仑王)
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