Masson染色实验报告分析

一、实验目的

对样本进行Masson染色,用于显示组织中的纤维

二、实验原理

用Masson染液进行染色时胶原纤维呈蓝色(被苯胺蓝所染)或绿色(被亮绿所染),肌纤维呈红色(被酸性品红和丽春红所染),这与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。如已固定的组织用一系列阴离子水溶性染料先后或混合染色,则可发现红细胞被最小分子的阴离子染料着染,肌纤维与胞质被中等大小的阴离子染料着染,而胶原纤维则被大分子的阴离子染料着染。由此说明了红细胞对阴离子染料的渗透性最小,肌纤维与胞质次之,而胶原纤维具有最大的渗透性。根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来。

三、实验结果

胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色,胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色,胞核黑蓝色。

四、实验通用设备与材料

1.仪器耗材

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2.主要试剂

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五、实验步骤

1.石蜡切片脱蜡至水。

2.铬化处理或去汞盐沉淀(甲醛固定的组织此步可略)。

3.依次自来水和蒸馏水洗。

4.用苏木精染液染核5-10 min

5.充分水洗,如过染可盐酸酒精分化,蒸馏水洗。

6.Masson复合染色液染色10-20 min,蒸馏水洗。

7.1%磷钼酸水溶液分化3-5 min

8.不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5 min

9.1%冰醋酸水溶液浸洗片刻。

10.95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固,显微镜观察。

二、常见问题分析及原因解析

1.染色易脱片:组织本身破碎或过硬等,用防脱载玻片可适当解决。

2.切片染色不均:取材固定不当,取材规范标准,固定彻底。

3.切片染色模糊不清:包埋时蜡的温度过高。

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