材料与仪器
溶液与缓冲液 引物试剂盒 MPC-E PCR仪 Gene PulserII 型系统
步骤
实验方案 A
1.通过加入下列物质来消化双链 cDNA
2.在 37°C 下消化 lh。
3.65°C 孵育 20 min 热失活限制性酶。
4.等体积 PCI 抽提后乙醇沉淀（实验方案 A, 第 2 步)。
5.将冲洗风干的沉淀重新悬浮于 20 ul LoTE 中。
6.继续进行第 4 步
实验方案 B
1.从试管中移去第二股链反应混合物，并用 50ul 洗液洗涤 1 次，然后移去洗液。
2.用 50ul 的 1x 限制性缓冲液洗涤试管 1 次
3.移去缓冲液，然后加入：
4.在 37C 下消化 lh。
5.通过在 65℃ 下放置 20 min 热失活限制性酶。
6.继续进行第 5 步。
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