慢病毒感染贴壁细胞实验方法

1.提前一天细胞铺板

提前一天种植细胞,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。

  • 感染实验
  • ⑴将EnvirusTM-LV用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成增强剂稀释液。

    ⑵将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成病毒稀释液。

    注:由于病毒浓度情况不同,具体病毒浓缩液用量酌情依据常规用量,建议进行和增强剂配合的梯度实验。

    ⑶将增强剂稀释液和病毒稀释液充分混合,4℃静置15分钟。

    ⑷上述混合液加入到含完全培养基的细胞上,37℃培养8小时后观察细胞状态,如没有明显变化,不要更换培养基,继续培养24小时后常规更换培养基。由于慢病毒感染较慢,一般在感染96小时后观察结果。

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