Mabtech:小鼠IFN-γ Elispot试剂盒

干扰素γ(IFN-γ)是一种二聚体可溶性细胞因子,是Ⅱ型干扰素类群中唯一的成员。IFN-γ具有抗病原体、免疫调节和抗肿瘤特性,能够促进自然杀伤(NK)细胞的活性,增加抗原呈递,激活诱导型一氧化氮合酶,诱导活化浆细胞产生IgG2a,并通过上调转录因子T-bet促进Th1细胞分化。鉴于该细胞因子在免疫反应中的重要作用,已有多种定量IFN-γ的方案。其中最简单的可能是酶联免疫吸附测定(ELISA),该方法通过抗体捕获细胞因子,用于检测血清样本和组织培养上清液中细胞因子的水平。此外,还有基于流式细胞术的检测方法,通过细胞通透化处理后,利用流式细胞术检测细胞内IFN-γ。通常,含有该细胞因子的细胞比例较低,且无法表明该蛋白是否具有功能、是否会分泌,也不能判断其是否针对特定抗原或多种抗原产生反应。为了检测针对特定抗原的IFN-γ反应,研究者开发了细胞培养检测法。在此方法中,CD4?和CD8?T细胞在抗原呈递细胞(APC)和目标蛋白肽段的刺激下进行培养,随后通过ELISA检测上清液中的IFN-γ水平。


近年来,与ELISA相比,市面上出现了多种?基于流式细胞术的珠阵列分析方法(bead array assays),这些方法能够更灵敏地在纳克水平检测低浓度细胞因子。然而,尽管这些检测法能够定量检测分泌的总细胞因子,但无法区分是少数细胞产生大量细胞因子,还是大量细胞分泌少量细胞因子。分泌细胞因子的细胞数量反映了针对特定免疫靶标的细胞数量。因此,酶联免疫斑点(ELISPOT)检测法是一种高灵敏度的免疫检测法,能够在单细胞水平检测细胞因子分泌细胞的频率。抗原特异性ELISPOT检测法能够定量检测特定细胞类型(CD4?或CD8?T细胞)针对特定抗原分泌IFN-γ的细胞数量。

在ELISPOT检测板上,特异性针对IFN-γ的抗体能够在细胞分泌后立即捕获IFN-γ,其检测下限通常可达10万分之一的细胞。该检测法的高灵敏度使其特别适用于研究特量细胞群体。

Elispot研究专家Mabtech提供的爆款小鼠IFN-γ Elispot试剂盒(3321-4AST-2, ELISpot Plus: Mouse IFN-γ (ALP))备受科研用户者的欢迎,该ELISpot 试剂盒用于通过ELISpot检测法计数分泌IFN-γ的小鼠细胞。

3321-4AST-2.png

 

将小鼠脾细胞(15万个细胞/孔)在不含或存在刀豆蛋白A(ConA)的条件下孵育过夜,用ELISpot分析分泌IFN-y的细胞数量。

为了方便更多研究者了解IFN-γ Elispot试剂盒(货号3321-4AST-2和3321-4AST-10)试剂盒的原理与操作,作为Mabtech品牌中国区代理商,艾美捷科技特为您汉化翻译3321-4AST-2和3321-4AST-10的英文操作说明书。   

艾美捷科技优势代理品牌

发表评论

:?: :razz: :sad: :evil: :!: :smile: :oops: :grin: :eek: :shock: :???: :cool: :lol: :mad: :twisted: :roll: :wink: :idea: :arrow: :neutral: :cry: :mrgreen: