萤火虫荧光素酶已被用作研究各种生物反应的敏感报告基因。它首先从北美 Photinus pyralis 克隆，在 ATP 和镁存在下催化 D-荧光素的氧化，发出黄光。该反应具有较高的量子产率，并且荧光素酶和荧光素都具有低毒性。这些特性使 Firefly 荧光素酶成为一种常用的工具。另一方面，海肾荧光素酶是 ATP 非依赖性的，在氧气存在下将腔肠素转化为腔肠酰胺，发出蓝光。与荧光蛋白相比，两种荧光素酶的半衰期都相对较低，并且可以进行动态研究。通过对同一样品中的对照报告基因（例如海肾荧光素酶报告基因）进行标准化，可以提高萤火虫荧光素酶报告基因响应特定刺激的准确性。
两步荧光素酶（Firefly & Renilla）检测系统设计用于在单个哺乳动物细胞培养样品中高通量、快速定量Firefly和Renilla荧光素酶。它随附的试剂足以在 96 孔板中进行 100 次检测，每次 100 μl。
该检测系统具有几个相关功能：
- 灵敏 – 对 Firefly 和 Renilla 荧光素酶活性的高灵敏度检测。
- 稳定 — 荧光素酶信号输出可稳定保存 1 小时以上，提供灵活的孵育时间。
- 高通量 – 其简单的均相方案可最大限度地减少处理步骤，并支持高通量筛选应用。
- 兼容性 – 适用于含有高达 10% 血清和酚红的各种常见培养基。
两步荧光素酶（Firefly & Renilla）检测系统方案概述。
将 Firefly 荧光素酶试剂直接添加到细胞培养基中。该试剂可裂解细胞，并包含允许 Firefly 荧光素酶产生发光信号的底物。接下来，将 Renilla Luciferase Reagent 添加到同一孔中。该试剂淬灭 Firefly 荧光素酶发光，并为海肾荧光素酶提供底物以产生海肾荧光素酶发光信号。两种反应产生的信号都可以在光度计上方便地测量。
两步荧光素酶（萤火虫和海肾）检测系统中涉及的化学反应。
Firefly 荧光素酶试剂缓冲液（组分 A）和 Firefly 荧光素酶试剂底物（组分 B）产生信号的化学反应。湾。海肾荧光素酶试剂缓冲液（组分 C）和海肾荧光素酶试剂底物（组分 D）参与信号生成的化学反应。
| PK对比 | ||
| 品牌 | BPS bioscience | Promega |
| 货号 | #60683-1；#60683-2；#60683-3 | #E2920, #E2940，#E2980 |
| 名称 | 荧光素酶检测体系
Two-Step Luciferase (Firefly and Renilla) Assay System |
Dual-Glo® Luciferase Assay System |
| 规格 | 10ml；100ml；1L | 10ml；100ml；1L |
| 灵敏度 | 高灵敏 | 高灵敏 |
| 输入量 | 100ul | 100ul |
| 介绍 | 通过对同一样品中的对照报告基因进行标准化，可以提高荧光素酶报告基因响应特定刺激的准确性 | 主要报告基因的活性与特定刺激的影响相关，共转染对照报告基因的活性提供了内部对照以使结果标准化 |
| 稳定性 | 较稳定，在-20℃可保存6个月 | 在-20°C下放置1周，在-70°C下放置6个月 |
| 产品成分 | Firefly Luciferase Reagent Buffer Firefly Luciferase Reagent Substrate Renilla Luciferase Reagent Buffer Renilla Luciferase Reagent Substrate |
Dual-Glo® Luciferase Substrate Dual-Glo® Luciferase Buffer Dual-Glo® Stop & Glo® Substrate Dual-Glo® Stop & Glo® Buffer |
| 产品预处理 | 无需预处理可随时使用 | 底物是冻干粉，且需要一次性稀释所有粉末，最多进行5次解冻循环 |
| 细胞系验证 | 广泛验证 | 无细胞系验证数据 |
 使用两步荧光素酶(Firefly&Renila)检测系统和另一种市售荧光素酶试剂测量荧光素酶活性 |
两步荧光素酶(萤火虫和海肾)检测系统组件海肾荧光素酶检测工作溶液可以完全淬灭萤火虫衍生的发光 |
BPS bioscience总部坐落于美国圣地亚哥生命科学研究机构和公司集中地的中心。公司主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶及其抑制剂的筛选试剂盒。BPS公司为药物研发用重组酶类的提供了重要的选择。
