材料与仪器
乙醇 β-巯基乙醇转子-定子均化器或类似设备 Marligen Rapid Total RNA System
步骤
一、材料1.缓冲液、溶液和试剂乙醇,70%和100%β-巯基乙醇2.特殊设备转子-定子均化器或类似设备3.其他Marligen Rapid Total RNA System(Marligen Biosciences)二、方法(1）加β-巯基乙醇制备裂解溶液。(2）按照厂商的方案要求，向细胞和组织样品中加裂解溶液（裂解液体积取决于所处理样品的大小）。用转子-定子均化器或类似设备均化。(3）向裂解产物中加等体积的70%乙醇。均质化裂解产物以使沉淀分散。(4）将裂解产物置随试剂盒提供的离心套柱中，在微量离心机中12000~16000g离心。(5）用700ul洗涤缓冲液1洗涤一次，12000~16000g离心1min。(6）用洗涤缓冲液2洗涤两次，每次500ul,12000~16000g离心1min。(7）12000~16000g离心2min以移弃残留洗涤缓冲液。(8）参照试剂盒的使用说明用适董的水从柱中洗脱RNA。然后储存于-70°C。较少的样品可用45ul水洗脱，样品较多可用20ul水洗脱。
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