材料与仪器
植物组织Concert Plant RNA试剂 NaCl 氯仿 异丙醇 乙醇 DEPC处理过的水
步骤
一、材料1.缓冲液、溶液和试剂ConcertPlantRNA试剂(Invitrogen)，4°C预冷NaCl,5mol/L(无RNA酶）氯仿异丙醇乙醇，75%,用DEPC处理过的水配置DEPC处理过的水2.细胞和组织适宜的植物组织（见二、方法中1），液氮冻后磨细二、方法1.向不超过0.lg研磨过的植物材料中加0.5ml冷的（4°C) Concert Plant RNA试剂。轻微振荡混合至样品重悬于试剂中。2.室温下水平放置管子温育5min。3.12000g离心2min以移去残渣。4.将上清液转移到无RNA酶的新管中，并加0.1ml5mol/l的NaCl。在实验台上轻敲管子以混合。5.加0.3ml氯仿，将管颠倒数次以混合。6.4°C下12000g离心l0min。7.将液相转移到无RNA酶的新管中。加等体积异丙醇至液相中。将管颠倒数次以混合。室温下温育10min。8. 4°C下12000g离心样品10min。9.小心移弃上清液，避免扰动沉降物。10.将lml75%乙酵加到沉降物中。室温下12000g离心lmin。11.移弃上清液，小心避免扰动沉降物。短时离心并吸去所有残留液体。12.将沉降物再溶解于10~30ulDEPC处理过的水中。如看到任何泥浊，则在室溫下12000g离心溶液1min。将上清液转移到无RNA酶的新管中，储存于-70°C。
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