L-乳酸脱氢酶测定实验-荧光光度计法测定还原反应

材料与仪器

LDH 稀释溶液磷酸钾 NADH 丙酮酸荧光光度计

步骤

实验所需「试剂」具体见「其他」

1.98 ml 实验混合物

1.png

0.02 ml LDH 稀释溶液

25℃ 时,在 260 nm 激发,470 nm 处测定每分钟荧光差异。用适当浓度范围的 NADH 浓度对荧光强度的标准曲线来确定比例因子。

计算

体积活性:

2.png

特殊活性:

3.png

常见问题

试剂:

0.1 mol/l 磷酸钾 pH 7.0

0.01 mol/l NADH(71 mg 溶于10 ml H2O 中)

0.1mol/l 丙酮酸(丙酮酸钠,Mr=110;110 mg溶于10 ml H2O 中)。

LDH 原料溶液(从猪心脏提取,例如 10 mg/ml,用 0.1 mol/l 磷酸钾 pH 7.0 稀释至 1 IU/ml)

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