克氏假单胞菌
一、菌种简介
1、菌种名称:克氏假单胞菌Pseudomonas knackmussii
2、分离基物:土壤/椰子树腐烂芯覆土
3、具体用途:研究
二、斜面或平板:1、拿到安瓿管中平板形式提供的菌种后请及时使用,成置4-15度条件下暂存,一般不超过一周,我们随附的空白平板供您应急.
2、若是多次使用,应制做成甘油管,放置在使-70℃至80℃冰箱或液氮中保藏。方法见下。三、冻干管:1、将安瓿管上部(非样品一端)在酒精灯上先均匀烧均表面,然后再烧灼上部一侧;2、灭菌水棉球点烧灼部位,出现裂纹后(注意安瓯管不要倒置);用灭菌镊子敲开:3.加入液体培养基约100uL(注意管壁可能会很烫,可冷却后再加液),打匀取少许接种至适宜培养基。附:-80℃和液氮保藏方法:(1)培养:将菌种接种于合适培养基,培养基用固体或液体均可,对生长较快(如大部分弧菌、希瓦氏菌)和生长较慢的菌株用液体培养基培养比较好。培养时期掌握在对数生长期或对数生长后期。(2)收集菌体:液体培养时,离心弃去上清液;以平板或斜面培养时,刮取菌体。(3)保护剂:20%甘油(或20%甘油+5%海藻糖保藏效果更好)灭菌。(4)分装:将菌体与保护剂混匀,菌体用量不能太少,混匀后看上去要浑浊;分装到若干冻存管。(5)降温:及时放冰箱,先放-20℃,1-2小时后转移至-70℃至-80℃。如放入液氨中保藏,须注意样品温度降至-40℃以下再放。(6)活化:从冰箱或液氮中取出甘油管后,立即放置在40C温水中摇晃使冰融化,约需50秒-100秒;吸取适量内容物至适宜培养基培养。*也可从冰箱或液氮中取出后,用低温冰盒保温,牙签刮取少许冰接种至合适培养基,甘油管可再放回原处低温保藏(注意动作要快避免过度升温)。四、常用培养基1、培养基名称:2216E
2216E培养基
酵母提取物
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1.0
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g
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蛋白胨
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5.0
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g
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牛肉膏
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1.0
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g
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正磷酸铁四水物FePO4x 4H2O
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0.01
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g
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琼脂
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16.0
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g
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过滤海水
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1.0
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L
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PH
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7.4-7.6
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