材料与仪器
水 Na2HPO4 KH2PO4 NH4Cl 抗生素玻璃瓶 烧瓶
步骤
1. 在一个2L烧瓶中,将如下配方中的各成分加入水中, 加热搅拌直至其溶解。(1)5 X M9培养基,每升30 g Na2HPO415 g KH2PO45 g NH4Cl2.5 g NaCl15 mg CaCl2(可加可不加)(2) 5 X M63培养基,每升10 g (NH4)2SO468 g KH2PO42.5 mg FeSO4• 7H2O用KOH调pH至7. 0(3) 5 X A培养基,每升5 g (NH4)2SO420.5 gKH2PO452. 5 g K2HPO42.5 g 二水柠檬酸(4) 1 X 培养基用无菌水稀释5X培养基,并且每升加人以下无菌溶液1 ml 1 mol/L MgSO4• 7H2010 ml 20%碳源(糖或甘油)2. 倒入玻璃瓶中,拧松盖子,于15 lb/in2高压灭菌15 min。3. 待培养基冷却至50°C以下(在这个温度时,手持瓶子可感觉热但能握得住),再加人其他补充成分和抗生素,玻璃瓶冷却至40°C以下,盖紧盖子。4. 可于室温无限期保存。
常见问题
1. 如果需要还可加入以下溶液0. 1 ml 0.5%维生素B1(硫胺素)5 ml 20% 酪蛋白水解物(casamino acid)(Difco)或L-氨基酸至40 μg/ml或 DL-氨基酸至80 μg/ml
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