家兔胚胎移植技术

简介

胚胎移植俗称人工授胎或借腹怀胎,是指将雌性动物的早期胚胎或通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的代孕雌性动物体内。

使之继续发育为新个体的技术。而家兔作为实验动物优越于其他动物,可作为大家畜胚胎移植的基础研究,并可为家畜遗传工程有关的胚胎操作新技术(胚胎分割、核移植、转基因等)提供可研究的胚源。

原理

胚胎移植的原理依据以下几个生理学基础:

①同种动物的供、受体的生殖器官的生理变化是相同的,为供体胚胎移入受体提供相同的生理环境。

②早期胚胎在一定时间内处于游离状态,为胚胎的收集提供了可能。

③受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应,为胚胎在受体内的存活提供了可能。

④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系,但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受任何影响。

材料与仪器

器材:

①注射器

②内径0.5~1 mm的特制吸管

③光照条件为8:16(光照:黑暗)小时的环境清洁级动物饲养室

试剂:

①材料:

②GnRH激素

③移卵液

步骤

家兔胚胎移植的基本过程可分为如下几步:

1.受体兔进行同期发情与假孕处理,每只受体兔肌内注射15 μg的GnRH激素(发情期比胚胎供体晚22小时),然后与结扎公兔合笼。

2.将各时期胚胎移植到输卵管内,先找出喇叭口,然后将内径0.5~1 mm的特制吸管吸取待移植的胚胎连同0.05 ml的移卵液小心地插入喇叭管,慢慢地放入输卵管,然后移人胚胎。

3.进行两侧输卵管移植,每侧移植3~5个胚胎。

4.受体兔在胚胎移植后送入光照条件为8:16(光照:黑暗)小时的环境清洁级动物饲养室内饲养。

5.在移植后14-16天,通过腹部触诊检查妊娠。受体妊娠31~32天妊娠到期,经自然分娩(第30-31天)或剖宫产手术(第32天)获得活的幼崽。

注意事项

1. 胚胎移植应尽量在无菌条件下操作,手术要做到准确迅速,胚胎在外停留时间越短越好,胚胎移植时室温应处于18~25 ℃,全过程大约30分钟。

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