HE检测实验报告(五)

一、实验目的对骨组织样本进行脱钙及HE染色。二、实验样本及分组

样本:大鼠、小鼠关节骨组织

分组:第一批、第二批、第三批

三、实验结果

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四、实验结论

样本中细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色。细胞质被伊红染成深浅不同的粉红色至深红色。对比鲜明可以清晰观察到组织形态。

五、实验材料

1.主要仪器

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2.主要试剂

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六、实验原理

苏木精-伊红染色法简称HE染色法,是最常用的染色方法。苏木精(hematoxylin)是阳离子染料,能够将细胞核内的嗜碱性物质染成蓝紫色。伊红(eosin)是阴离子染料,能够将细胞质和胶原纤维等染成粉红色。

七、方法步骤

1.钙包埋①取大小鼠骨组织中性福尔马林固定。②骨组织浸入EDTA脱钙,每周更换一次脱钙液脱钙4-12周(根据组织大小决定)。③脱钙终点评判:针扎切割无阻力感。④脱钙结束后的骨组织用自来水流水冲洗12-24h⑤骨组织脱水浸蜡包埋切片2.脱蜡70烤片30min②二甲苯(I)中脱蜡10 min③二甲苯(II)中脱蜡10 min100%乙醇(I)中5 min洗去二甲苯;100%乙醇(II)中5 min洗去二甲苯;3.水化95%乙醇中水化5 min85%乙醇中水化5 min75%乙醇中水化5 min蒸馏水中水化待用;4.染色苏木素染色3min流水冲洗2 min1%盐酸酒精分化2 s流水冲洗切片15 min蒸馏水过洗1-2 s;⑥伊红染色30s;5.分化根据颜色深浅用80%的乙醇分化;85%乙醇脱水5 min95%乙醇脱水5 min无水乙醇脱水10 min无水乙醇脱水10 min6.透明二甲苯(I)透明10 min二甲苯(II)再次透明10 min7.封片在石蜡切片的中央滴加一滴中性树胶,盖上盖玻片封固。8.镜检

显微镜下观察拍照。

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