HE检测实验报告(四)

一、实验目的

对组织样本进行HE染色。

二、实验样本及分组

样本:大鼠心肌

三、结果

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四、实验结论

样本中细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色。细胞质被伊红染成深浅不同的粉红色至深红色。对比鲜明。可以清晰观察到组织形态,符合HE染色结果的要求。

五、实验材料

1.主要耗材

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2.主要试剂

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六、实验原理

苏木精-伊红染色法简称HE染色法,是最常用的染色方法。苏木精(hematoxylin)是阳离子染料,能够将细胞核内的嗜碱性物质染成蓝紫色。伊红(eosin)是阴离子染料,能够将细胞质和胶原纤维等染成粉红色。

七、实验步骤

1.脱蜡

1)70℃烤片5min

2)二甲苯(I)中脱蜡10 min

3)二甲苯(II)中脱蜡10 min

4)100%乙醇(I)中5 min洗去二甲苯;

5)100%乙醇(II)中5 min洗去二甲苯;

2.水化

1)95%乙醇中水化5 min

2)85%乙醇中水化5 min

3)75%乙醇中水化5 min

4)蒸馏水中水化待用;

3.染色

1)苏木素染色10 min

2)流水冲洗2 min

3)1%盐酸酒精分化2 s

4)流水冲洗切片15 min

5)蒸馏水过洗1-2 s

6)伊红染色10 min

4.分化

1)根据颜色深浅用80%的乙醇分化;

2)85%乙醇脱水5 min

3)95%乙醇脱水5 min

4)无水乙醇脱水10 min

5)无水乙醇脱水10 min

5.透明

1)二甲苯(I)透明10 min

2)二甲苯(II)再次透明10 min

6.封片

在石蜡切片的中央滴加一滴中性树胶,盖上盖玻片封固。

7.镜检

显微镜下观察拍照。

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