一、实验目的
对组织样本进行HE染色。
二、实验样本及分组
样本:大鼠心肌
三、结果
四、实验结论
样本中细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色。细胞质被伊红染成深浅不同的粉红色至深红色。对比鲜明。可以清晰观察到组织形态,符合HE染色结果的要求。
五、实验材料
1.主要耗材
2.主要试剂
六、实验原理
苏木精-伊红染色法简称HE染色法,是最常用的染色方法。苏木精(hematoxylin)是阳离子染料,能够将细胞核内的嗜碱性物质染成蓝紫色。伊红(eosin)是阴离子染料,能够将细胞质和胶原纤维等染成粉红色。
七、实验步骤
1.脱蜡
1)70℃烤片5min;
2)二甲苯(I)中脱蜡10 min;
3)二甲苯(II)中脱蜡10 min;
4)100%乙醇(I)中5 min洗去二甲苯;
5)100%乙醇(II)中5 min洗去二甲苯;
2.水化
1)95%乙醇中水化5 min;
2)85%乙醇中水化5 min;
3)75%乙醇中水化5 min;
4)蒸馏水中水化待用;
3.染色
1)苏木素染色10 min;
2)流水冲洗2 min;
3)1%盐酸酒精分化2 s;
4)流水冲洗切片15 min;
5)蒸馏水过洗1-2 s;
6)伊红染色10 min;
4.分化
1)根据颜色深浅用80%的乙醇分化;
2)85%乙醇脱水5 min;
3)95%乙醇脱水5 min;
4)无水乙醇脱水10 min;
5)无水乙醇脱水10 min;
5.透明
1)二甲苯(I)透明10 min;
2)二甲苯(II)再次透明10 min;
6.封片
在石蜡切片的中央滴加一滴中性树胶,盖上盖玻片封固。
7.镜检
显微镜下观察拍照。