过氧化物酶的测定实验-供体:愈创木酚

材料与仪器

酶样品磷酸钾 邻甲氧基苯酚 H2O2 溶液分光光度计

步骤

实验所需「试剂」具体见「其他」

0.97 ml 实验混合物

6.png

0.02 ml 酶样品(用 0.1 mol/L 磷酸钾溶液 pH 7.0,稀释浓缩的原料溶液大约 2000 倍)

开始加入 0.01 ml 0.1 mmol/L H2O2溶液

随后,25 ℃、436nm 处吸收值发生变化,ε436=25.5×103l/(mol·cm)。(Makinen 和 Tenovon,1982)。

常见问题

试剂:

0.1 mol/L 磷酸钾,pH 7.0

0.02 mol/L 邻甲氧基苯酚(2-甲基苯酚,儿茶酚,氢醌单甲基醚,Mr=124.1;24.8 mg 溶于 10 ml 水中)

H2O2溶液(约 10 mmol/L):0.06 ml 30% H2O2稀释于 50 ml 0.1 mol/L 磷酸钾溶液 pH 7.0,在 240 nm 处以缓冲液为对照的吸收值约为 0.50。

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