甘油菌接种：
1.从-80冰箱中取出甘油菌种，立即放置在37-45℃水浴中快速融化并适当摇动，直至管内甘油菌液全部溶解。
2.无菌操作下打开甘油管，用无菌滴管将菌种转移到新鲜的培养基上进行培养。
3.建议一管甘油菌种接种两个15cm试管斜面或两个90mm平板。
4.避免反复冻融。
甘油菌制备：
1.配置百分之20的甘油（20ml丙三醇加入蒸馏水，定容到100ml），121度15min灭菌后备用。
2.无菌滴管吸取甘油把培养基表面的菌种冲洗下来，形成菌悬液。
3.吸取菌悬液，分装到冻存管中，放入负80度冰箱。
4.制备的用到的所有耗材，都要121°15min灭菌。
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