ELISA检测实验报告(二)

一、实验目的

通过Elisa实验技术检测各样本中目的蛋白的表达。

二、实验样本

image.png

三、实验结果

1.标准品检测值

image.png

2.标准品标准曲线

image.png

标准曲线结果显示,本次cTn-1检测结果可信。

3.样品检测结果

image.png

四、结果说明

如图所示,与Sham组相比,3CVB3病毒处理组无显著性差异。

五、ELISA实验原理

往预先包被的微孔中依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的cTn-1呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD),计算样品浓度。

六、实验通用仪器及试剂

1.主要仪器

image.png

2.主要试剂

image.png

六、重温一下ELISA实验步骤

1.样品处理

血清:3000xg离心10分钟,取上清即可检测。

2.ELISA检测步骤(以试剂盒操作说明书为准)

(1)制备好所有试剂、工作标准品和样品。

(2)从板架上移除多余的微孔板条,将它们放入装有干燥剂包的铝箔袋中,重新密封并4ºC存储。

(3)向适当的孔中加入50µL样品和标准品。

(4)每孔加入50µL抗体混合物。

(4)盖好孔,在室温下温育1小时,400rpm摇动。

(5)弃去溶液并用洗涤缓冲液洗涤3次。

(6)向每个孔中加入100μlTMB,400rpm避光室温孵育100min

(7)每孔中添加100µL终止液,混匀1min,450 nm处读取吸光值。

内容来源:生物资料网,如果侵权麻烦联系网站工作人员删除!

艾美捷科技优势代理品牌

发表评论

:?: :razz: :sad: :evil: :!: :smile: :oops: :grin: :eek: :shock: :???: :cool: :lol: :mad: :twisted: :roll: :wink: :idea: :arrow: :neutral: :cry: :mrgreen: