DNA 污染的洗脱后去除实验

材料与仪器

EDTA DNA 酶Ⅰ DNA 酶Ⅰ缓冲液 RNA 样品水浴锅

步骤

一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂用焦碳酸二乙酯(DEPC) 处理过的水EDTA,25 mmol/L2. 酶和酶缓冲液DNA 酶Ⅰ, 扩增级(无 RNA 酶)DNA 酶Ⅰ缓冲液,10X3. 核酸和寡核苷酸RNA 样品4. 特殊设备水浴,预设为 65°C二、方法①向一无 RNA 酶的管中加下列成分。RNA 不多于 80ugDNA 酶 I 缓冲液,10X 1ulDNA 酶 I(lU/ul) 1ul用 DEPC 处理过的水将总体积调到 10ul。②室温下温育 15 min。③加 1ul25 mmol/L 的 EDTA 溶液,并于 65°C 加热 10min 以灭活 DNA 酶 I。用这种方式处理的样品适合直接用于 RT-RCR。

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