雌性小鼠生殖生物学分析实验-超数排卵实验

简介

超数排卵实验的目的是检测卵巢是否能够有效应答相应激素诱导的超数排卵;检测超排出的卵细胞形态是否正常。

材料与仪器

器材:

① 显微镜。

试剂:

① PMSG;

② hCG;

③ 透明质酸酶。

步骤

超数排卵实验的基本过程可分为如下几步:

A 将未性成熟的 24 日龄小鼠注射 5 U 的 PMSG 以保证卵泡的同步成长和超排卵实验。48 小时后注射 5 U 的 hCG 诱导超排卵。

B 注射 hCG 后 14 小时将小鼠断颈处死,解剖镜下取出两侧输卵管和卵巢,放入生理盐水中,用一次性注射器针尖撕开输卵管膨大部分,观察到有絮状物释放出来,即为卵母细胞-卵丘细胞复合体。

C 将卵母细胞-卵丘细胞复合体收集到装有 0.1% 透明质酸的培养皿中,37 ℃ 培养箱中处理 5 分钟,卵丘细胞会从卵细胞周围脱离,用玻璃管可以分离得到超排卵细胞。

D 显微镜下观察,计数卵细胞数量,排出第一极体的卵细胞数量。显微镜下拍摄分析卵细胞的直径。

注意事项

1 本实验每组小鼠的数量应该达到 5 只以上,以利于统计学分析。

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