常用培养基配方(六)

1 三糖铁琼脂(换用方法)

成分:

蛋白胨 15g

眎胨 5g

牛肉膏 3g

酵母膏 3g

乳糖 10g

蔗糖 10g

葡萄糖 1g

氯化钠 5g

硫酸亚铁 0.2g

硫代硫酸钠 0.3g

琼脂 12g

酚红 0.025g

蒸馏水 1000mL

pH7.4

制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH。加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂。加入0。2%酚红水溶液12。5mL,摇匀。分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层。121℃高压灭菌15min,放置高层斜面备用。

2 克氏双糖铁琼脂(KI)

上层培养基成分

血消化汤(pH7.6) 500mL

琼脂 6.5g

硫代硫酸钠 0.1g

硫酸亚铁铵 0.1g

乳糖 5g

0.2%酚红溶液 5mL

下层培养基成分

血消化汤(pH7.6) 500mL

琼脂 2g

葡萄糖 1g

0.2%酚红溶液 5mL

制法:

1 取血消化汤按上层和下层的琼脂用量,分别加入琼脂,加热溶解。

2 分别加入其他各种成分。将上层培养基分装于烧瓶内;将下层培养基分装于灭菌12mm×100mm试管内,每管约2mL。115℃高压灭菌10min。

3 将上层培养基放在56℃水浴箱内保温;将下层培养基直立放在室温内,使其凝固。

4 当下层培养基凝固后,以无菌手续将上层培养基分装于下层培养基的上面,每管约1.5mL,放成斜面。

3 克氏双糖铁琼脂(换用方法)

成分:

蛋白胨 20g

牛肉膏 3g

酵母膏 3g

乳糖 10g

葡萄糖 1g

氯化钠 5g

柠檬酸铁铵 0.5g

硫代硫酸钠 0.5g

琼脂 12g

酚红 0.025g

蒸馏水 1000mL

pH7.4

制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH。加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂。加入0。2%酚红水溶液12。5mL,摇匀。分装试管,装量宜多些,以便得到比较高的底层。121℃高压灭菌15min。放置高层斜面备用。

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