测定蛋白质浓度前需要知道什么?

因为蛋白质是细胞结构与功能的主要分了成分,因此常常需要测定样品中蛋白质的含量,鉴定混合物中的特殊蛋白质,以及分析蛋白质的组成和序列。此外,蛋白质分析对合成用于诱导抗体生成的多肽,设计供克隆用的寡核苷酸探针以及证实序列数据的正确性是十分必要的。

为确保蛋白质通过电泳技术获得最好的分离,首先有必要估计待测样品中蛋白质的浓度。如果不做分析,蛋白质总量不足就可能妨碍对目的蛋白的鉴定,而另一方面, 蛋白质含量太高则会使带型扭曲,有时甚至会严重损害电泳方法的高分辨能力。因此,有必要对加到凝胶中的蛋白质总量做至少粗略的估计,分析生物样品中蛋白质浓度,应该注意的是,许多细胞生物学分析中,预先确定数目的细胞会被用于特定分析。因此,确定进行该项工作的这种细胞中特定数目细胞的平均蛋白质浓度是很有用的,这样就可以使用这个平均浓度作为将来实验中蛋白质浓度的参数。

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