生物知识 电转染过程中易出现的问题 1. 不合适的电场强度合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 慢病毒感染细胞后,细胞长满48小时是否可以先传代,再等到72小时再喷霉素筛选吗 通常在进行慢病毒感染后,建议遵循以下操作步骤:感染后观察细胞状态:感染后一般在48-72小时内可以看到较为明显的表达,但是否开始筛选需要看细胞的状态和感染效率。如果... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 人胚胎肺成纤维细胞的培养 成纤维细胞作为体外最易培养成功的正常细胞,用途广泛。但由于其有限的传代寿命,通常用于细胞衰老的研究,在肿瘤研究中,常常作为正常细胞对照,用于研究细胞恶性转化的条件和... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 RNA转染过程中细胞毒性大怎么办? RNA转染时细胞毒性大可能的原因有:1.RNA与转染试剂比例不佳。建议进行预实验优化。2.细胞密度不佳。调整细胞密度。3.细胞污染。建议彻底清洁所有细胞培养相关用品... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 实验室小白篇:细胞培养用的液体 一、细胞培养所需的培养液在细胞的研究和利用过程中,最主要的是要为细胞提供最适的生长条件,保持细胞培养开始时的群体状态。这就要求培养条件始终如一,近乎呆板地坚守细节和... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 慢病毒感染后,未能实现相关敲降的原因是什么? 慢病毒感染后未能实现敲降的原因可能有多种。以下是一些可能的原因及其解释:慢病毒包装质量问题:病毒滴度较低,导致感染效率不高,可能无法有效转导目标细胞。病毒颗粒中没有... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 提高RNA转染效率的几点建议 1.纯化RNA在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 改良的Boyden 小室法观察细胞的的运动性 该方法常用来检测白细胞和巨噬细胞的趋化性,后经改良用于肿瘤细胞运动性、侵袭性等的测定。Boyden 小室由上、下两个室组成,两室中间由带微孔的滤膜分隔,也可用鸡胚尿... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 如何能达到较高的细胞转染效率? 1.选择合适的转染试剂 不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 电转效率受哪些因素影响? 电穿孔效率受以下几种因素的影响:外加电场的强度。电压过低,培养细胞质膜的改变不足以允许DNA 通过; 电压过高,细胞会受到不可逆的损伤。对于大多数哺乳动物细胞系, ... 05月03日 发表评论 阅读全文