生物知识 做好RNA转染的几点建议 1.纯化RNA在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 都说RNAi很容易降解,转染效率很低,是真的吗? RNAi就是利用降解双链RNA的酶系统,人工引入一段和目标RNA互补的序列,这样,在细胞内形成双链RNA,诱发降解机制,使目标RNA降解,无法被进一步翻译。在转染过... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 单层细胞如何用胰蛋白酶处理? 下述方案描述的是采用胰蛋白酶处理细胞,进行细胞的传代或收集。维持细胞系的方法通常为每周传代一次,在传代的前一天换培养液;但是某些细胞系需要更频繁的传代。每种细胞系应... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞的聚集体培养 聚集体培养(aggregate culture) 是指先将肿瘤细胞在旋转摇动培养仪上培养,使肿瘤细胞形成规则的细胞球体结构,然后再将球体进行静止培养,肿瘤细胞可自由... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 如何优化RNA转染条件? 可从以下几方面进行优化:1.纯化RNA在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 siRNA细胞转染应注意的事项 为了达到高的转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点:1.纯化siRNAsiRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞转染效率低的原因及解决方案 细胞转染是细胞生物学和分子生物学的一种常用的技术手段。而转染效率低下却是实验人员经常遇到的问题,尤其是原代细胞转染,转染难度更大。现分享几个细胞转染实验常见的几个陷... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 成功转染siRNA的主要关键点有什么? 1.设计合成有效的siRNARNAi的核心需要siRNA对相应mRNA进行有效的结合和作用。siRNA的设计合成首先很重要,最优的设计可以用最小的工作浓度取得满意的... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 慢病毒转染贴壁细胞实验方法 1.提前一天细胞铺板提前一天种植细胞,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。感染实验⑴将EnvirusTM-LV用无血... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 PBMC细胞可以用电转染吗 PBMC细胞(外周血单个核细胞)可以通过电转染(electroporation)进行基因转染。然而,由于PBMC细胞包括T细胞、B细胞、单核细胞和NK细胞等多种类型... 05月03日 发表评论 阅读全文