生物知识 siRNA答疑专题总结(上) Q1:如果慢病毒载体中没有抗性标记,只有GFP,请问还能筛选稳转的细胞传代培养吗?A1:采用流式分选是流式细胞仪的一个功能,有流式细胞仪就可以了。一般实验室对流式都... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 siRNA细胞转染实验步骤 下面以Entranster-R4000试剂为例,说一下siRNA转染步骤(24孔板)1.提前1天细胞种植贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞汇合度... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 视神经星状胶质细胞的培养 随着细胞培养技术的不断改进,虽然正常细胞难于培养成活,科研人员还是不断研究各种正常细胞的培养方法。到目前为止,几乎体内各种组织细胞均可在体外成功培养。越来越多的研究... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 RNA转染(entranster)后沉默现象不明显怎么办? 可能原因:1. RNA与转染试剂比例不佳。可进行预实验优化。2. 细胞密度不佳。 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。3. RNA效率不高。选择最优RNA,并... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 siRNA转染实验的关键点 1.纯化siRNAsiRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 shRNA的质粒转录水平敲下来了百分之90的解决办法 根据描述,您的shRNA已经成功将转录水平(mRNA水平)敲低了90%,但蛋白水平却没有显著变化。这种情况在RNA干扰实验中并不罕见,可能由以下原因导致:可能原因分... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 RNA转染效率低的原因是什么? RNA转染效率低,可能的原因:· 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂,如Entranster试剂。· 转染试剂和RNA的量不够,或者比例不对。优化实验条件,... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 BHK-21细胞的电转染条件是什么? 使用Entranster-E电转液与指数衰减脉冲电转仪时BHK-21细胞的电转染条件是:对于0.2 cm电转杯,细胞密度为10×10^6 cells/ml,DNA用... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞复苏的步骤 真核细胞通常悬浮在带有血清和冷冻剂的培养基内,保存在-196°C 的液氮中。如果是商业订购的,通常储存在用干冰包裹的冻存管中。所以冻存后的细胞必须快速解冻后立即培养... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞转染的实验方法都有什么? 1. 电穿孔法。通过短暂的高电场电脉冲处理细胞,沿细胞膜的电压差异会导致细胞膜的暂时穿孔。DN被认为是穿过孔扩散到细胞内的。电脉冲和场强的优化对于成功的转染非常重要... 05月03日 发表评论 阅读全文