一、探针的标记如下设置探针标记的反应体系：（1）待标记探针 (1.75 pmol/μl) ：2μl（2）T4 Polynucleotide Kinase Buffe...
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Western-blot化学发光(ECL)时，胶片上条带很弱是什么原因？
条带弱的原因可能有以下几个方面：①. 因为蛋白上样量低或目的蛋白在来源组织或细胞中的表达量并不丰富造成。可适当加大蛋白上样量，也可通过提高抗体稀释度或采用灵敏度更高...
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DNA分离前你应该知道的那些事
DNA 是相当稳定的。这也是保存和传递遗传信息所必须具备的但是不能因此而太随意，DNA的污染来源主要是其他DNA 。DNA 分离分离的DNA可以是基因组的也可以是染...
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体外转录法制备dsRNA
该方案是简单而且得到广泛应用的、利用PCR 模板制备双链RNA 的体外转录反应。该方法制备的dsRNA 可以用于在某些细胞或者组织中诱发RNA 干扰。试剂琼脂糖凝胶...
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分子克隆中常用的其他酶
一、DNA 聚合酶分子克隆中的许多步骤都涉及在DNA 聚合酶催化下的DNA 体外合成反应。这些酶作用时大多需要模板，合成产物的序列则与模板互补。大多数聚合酶优先作用...
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从革兰氏阴性菌（如E.coli）中分离DNA
从细菌中分离DNA 需要依赖SDS 和蛋白酶K 以裂解细胞。高分子质量的DNA 需要剪切（以减少它的黏性，更适合操作），用酚和氯仿提取，再用异丙醇提纯。该方案可以分...
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western-blot实验常见问题及解答
常见问题解决对策两块玻璃板之间灌胶，胶总是不平玻璃没有洗干净，应该洗得很干净过硫酸铵和TEMED加量相对较多加完试剂后应摇匀 总是漏胶避免玻璃边缘（与胶条接触处）破...
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荧光原位杂交会用到哪些试剂？
一、实验材料、试剂、仪器耗材：人的MyoD1（MYF3)基因探、人外周血中期染色体细胞标本指甲油、甲酰胺、氯化钠、柠檬酸钠、氢氧化钠、吐温20等恒温水浴锅、培养箱、...
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Trizol法提取总RNA的原理及注意事项
原理：Trizol试剂是直接从细胞或组织中提取总RNA的试剂。在样品裂解或匀浆过程中，Trizol能保持RNA的完整性。加入氯仿后离心，样品分成水样层和有机层。RN...
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聚丙烯酰胺凝胶电泳注意事项
聚丙烯酰胺凝胶必须由丙烯酰胺单体、聚合起始物、催化剂以及合适的盐及缓冲液的混合物聚合起来。丙烯酰胺与BIS (N, N’ – 亚甲双丙烯酰胺）是形成胶基质的单体。过...
