生物知识 利用有机溶剂分离纯化高分子质量DNA 分子克隆最基础的操作可能就是核酸纯化了。去除蛋白质的关键步骤经常是简单地利用酚:氯仿和氯仿把DNA 从水相中萃取出来。这种萃取可在进行一步法克隆操作前有效灭活和去除... 05月04日 发表评论 阅读全文
生物知识 离心机的种类 有很多关于离心机类型的描述性术语,但那些不是严格的定义。在实验室中,离心机通常以制造者的名字相称。高速与超速离心机都带有冷冻装置,之所以需要冷冻是因为高速离心会产生... 05月04日 发表评论 阅读全文
生物知识 siRNA是从牵牛花过表达发现的吗 siRNA(small interfering RNA, 小干扰RNA)并不是从牵牛花的过表达现象中发现的,而是从研究植物基因沉默和RNA干扰现象中逐步发展起来的。... 05月04日 发表评论 阅读全文
生物知识 真空浓缩仪的使用方法 如果在乙醇沉淀后,核酸中还残留乙醇,就很难用水或缓冲液溶解沉淀。如果你急用或者需要去除大体积的挥发性液体,可以使用真空浓缩设备。真空浓缩设备由离心机、真空泵、加热器... 05月04日 发表评论 阅读全文
生物知识 siRNA表达载体的构建成功要点 对每个基因设计并检测两到四个siRNA序列为了找到潜在靶位点,扫描靶基因中的AA序列。记录每个AA 3’端19个核苷酸作为潜在siRNA靶位点。潜在靶位点需通过GE... 05月04日 发表评论 阅读全文
生物知识 影响western-blot实验的因素有哪些? 1. 样品质量。所抽取样品的蛋白含量,蛋白变性是否充分等等,还有,蛋白样品的PH值是否在7~8之间。这会直接影响到样品浓缩的效果。此外,蛋白样品是否降解、目的蛋白是... 05月04日 发表评论 阅读全文
生物知识 如何制备双链siRNA? 试剂丙烯酰胺: 双丙烯酰胺(19 : 1, 40%,m/V)过硫酸铵( 10%,m/V)复性缓冲液(10 X )2‘脱保护缓冲液[100 mmol/L 乙酸,用四甲... 05月04日 发表评论 阅读全文
生物知识 RNAi、miRNA及siRNA的区别和联系 RNA干扰 (RNAi):近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相... 05月04日 发表评论 阅读全文
生物知识 缺口翻译标记DNA 下面程序描述了使用修饰染料核苷酸,用同步DNA 切割通过缺口翻译制备荧光DNA,缺口翻译是通过摸索修饰dUTP 和dTP 的荧光素或花青的最佳条件完成的(Kelle... 05月04日 发表评论 阅读全文
生物知识 抗体的使用以及储存方式 一、什么是抗体抗体是一些淋巴细胞直接抵抗外来分子所产生的蛋白质,它们是免疫系统的重要组成成分,是实验室的重要工具。多克隆抗体是用抗原注射动物产生的,针对相同蛋白质的... 05月04日 发表评论 阅读全文