生物知识 培养基手册 一、培养基的历史体外培养(in vitro culture)包括:组织培养(tissue culture)、细胞培养(cell culture)、器官培养(orga... 05月06日 发表评论 阅读全文
生物知识 原代细胞的取材 一、取材的基本要求(1)取材要注意新鲜和保鲜新鲜组织易于培养成功,取材时应尽量在4~6h内能制作成细胞,尽快入箱培养,若不能即时培养,应将组织浸泡于培养液内,于4℃... 05月06日 发表评论 阅读全文
生物知识 分离肺泡上皮细胞的步骤 一、取得完全无血液残留的肺脏:实验前j将大鼠全身血液放净,取得完全无血液残留的肺脏二、消化肺组织:常用于细胞消化的酶有胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。胰蛋白酶是最早用... 05月06日 发表评论 阅读全文
生物知识 原代细胞培养实验室组建的基本要求 一、实验室设计1、细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。2、细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响... 05月06日 发表评论 阅读全文
生物知识 牙髄细胞的传代 牙髄细胞中主要是成纤维细胞,贴壁生长。传代方法:弃培养液(尽量吸干)加基础培养基配置的0.2%trypsin+0.02%EDTA轻轻翻转培养瓶使消化液浸过有细胞的瓶... 05月06日 发表评论 阅读全文
生物知识 体外细胞的原代培养、传代培养、冻存和复苏 一、实验原理细胞培养可分为原代培养和传代培养。直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为原代培养;当原代培养的细胞增殖达到一定密度后,则需要做再培养, 即将培养的细胞分... 05月06日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞培养常见问题汇总 1. 冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后, 须立即放入37 ℃水槽中快速解冻, 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化, 并注意水面不可超过冷冻管盖沿, 否则易发生污染情形... 05月06日 发表评论 阅读全文
生物知识 原代细胞传代技术 一、贴壁细胞的消化法传代1、吸除或倒掉瓶内旧培养液。2、加入1ml左右消化液(胰蛋白酶或与EDTA混合液)轻轻摇动培养瓶,使瓶底细胞都浸入溶液中。3、消化2-5分钟... 05月06日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞培养中污染的清除和预防 一、污染的清除培养细胞一经污染,多数较难处理。如果污染细胞价值不大,宜弃之;有细胞株留存的或可购置的,可在寻找原因后彻底消毒操作室,复苏或重新购置细胞,再培养。若污... 05月06日 发表评论 阅读全文
生物知识 胚胎干细胞培养标准化操作规程(SOP) 一、细胞多能性胚胎干细胞产生于小鼠胚泡1.表达绿色荧光蛋白(EGFP)的B5-ES细胞。由Dr. Nagy的实验室制备。2.D3-ATCC; CRL-1934. 我... 05月06日 发表评论 阅读全文