EDTA和Tris的混合液,配方：Tris-Cl (pH7.4) 20mM，EDTA 1mM.可加入蛋白酶抑制剂,提取磷酸化的蛋白还需加Na3VO4 0.1mM及N...
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纯化全长/高纯度蛋白方法（ Double-tag）
Double-tag在蛋白纯化过程中的应用 Protein表达是一个非常复杂的过程，因此很难预测表达的蛋白是否是可溶性的、包涵体形式还是部分降解的。为了预防各种可能...
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ABIGEN实验方法
DNA提取次柱漂洗确保高纯度，典型的产量200µl全血可提取出3-6µg，OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达30 kb -50kb，可直接用...
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蛋白质组学同位素标记的亲和标签方法
Aebersold和其合作者开发了一种同时对蛋白质组进行鉴定和相对定量的方法，即一种包含在无胶蛋白质组流程中的同位素标记技术(Gygi等，1999)。他们提出使用一...
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Western Blot详解－常见的问题指南（三）
6. 染色的选择OO. Western Blot哪种染色好？ 解答：（1）阴离子染料是最常用的，特别是氨基黑，脱色快，背景低检测极限可达到1.5μg，考马虽然与氨基...
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Western Blot详解－常见的问题指南（二）
4. 滤纸、胶和膜的问题X. NC膜\ PVDF膜\ 尼龙膜怎样鉴别？ 解答：尼龙膜是较理想的核酸固相支持物，有多种类型；硝酸纤维素膜是目前应用最广的一种固相支持物...
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蛋白质提取与制备
1蛋白质提取与制备 蛋白质提取与制备蛋白质种类很多，性质上的差异很大，既或是同类蛋白质，因选用材料不同，使用方法差别也很大，且又处于不同的体系中，因此不可能有一个固...
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Western Blot 的注意事项
1. 把聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质电泳转移到硝酸纤维膜上。1）转移缓冲液洗涤凝胶和硝酸纤维素膜，将硝酸纤维素膜铺在凝胶上，用5ml移液管在凝胶上来回滚动去除所有的气泡...
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电极缓冲液中甘氨酸的作用
甘氨酸同Tris（三羟甲基氨基甲烷）一起组成电泳缓冲液中的缓冲对，可以稳定电泳过程中的PH值。在SDS-PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲...
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荧光素酶的测定实验
简介以荧光素（luciferin）为底物来检测萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase）活性的原理荧光素 4-单氧酶（ATP-水解）提取于萤火虫，Pho...
