生物知识 最新融合表达的亲和纯化小标签StrepTaq 在重组蛋白纯化的过程中,研究者常常利用融合表达的各种亲和标签,通过一步法亲和纯化的方法获得自己的目的蛋白。其中,6×His•Tag标签因其氨基酸个数少、对蛋白活性影... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 原核表达实验方法 一、原理1、E .coli 表达系统E .coli 是重要的原核表达体系。在重组基因转化入E .coli 菌株以后,通过温度的控制,诱导其在宿主菌内表达目的蛋白质,... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 在大肠杆菌(E.Coli)表达蛋白产物 一、原理 1、 E . coli 表达系统 E . coli 是重要的原核表达体系。在重组基因转化入E . coli 菌株以后,通过温度的控制,诱导其在宿主菌内表达... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 Cas9 蛋白过表达慢病毒包装 一、试剂准备1、Cas9 过表达慢病毒载体选择。货号名称CR2001pLV-Cas9-PuroCR2002pLV-Cas9-NeoCR2003pLV-Cas9Nic... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 种子蛋白质系统分析:种子蛋白质组分分析 一、目的 种子蛋白质由10%-15%的原生质蛋白质(复合蛋白质)和85%-90%的贮藏蛋白质(简单蛋白质)组成。Osbome 在种子中发现与分离出来清蛋白、球蛋白、... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 表达蛋白的生物学活性的检测 一、MTT比色法检测细胞活性(一)原理活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷,其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 原核表达–宿主菌株选择指南 原核蛋白表达在原核蛋白表达过程中,选择构建一个合适原核表达体系需要综合考虑3大因素:表达载体、宿主菌株、表达诱导条件,以获得最满意的表达效果。事实上,在平时的实验中... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 原核表达条件优化 影响E.coli 中蛋白表达量的因素影响E.coli 中蛋白表达量的因素除载体启动子结构以外,还有质粒拷贝数、质粒稳定性、mRNA结构、密码子的偏爱性和宿主菌的生长... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 His-Tag原核表达――Qiagen 分子诊断近年来Qiagen公司无论在分子诊断方面,还是核酸、蛋白纯化方面都有出色的表现。在分子诊断这一块,根据Kalorama Information网站自2003... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 His Tag的功与过 先介绍一下His Tag,为5-15 His 串在一起的小肽, 在表达纯化中用的较为普遍的一种Tag, 从本质上说它是一种亲和性Tag,但也个案证明其也能做一些兼职... 05月08日 发表评论 阅读全文