生物知识 BCA(二喹啉甲酸)蛋白分析法 一、原理 BCR蛋白分析是一种对样品中总蛋白进行量化的分析方法,原理是在碱性溶液中蛋白质可以将Cu2+还原成Cu1+(双缩脲反应),从而出现明显的紫色,铜离子被还原... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 豆粕中尿素酶活性的测定 一、实验目的掌握测定尿素酶活性的各种方法的基本原理及方法步骤。二、实验原理将粉碎的大豆制品与中性尿素缓冲溶液混合,在30℃保持30min后,尿素酶催化尿素水解产生氨... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 重组蛋白在E.coli中表达及纯化 一、实验目的 1. 掌握重组蛋白诱导表达的方法; 2. 亲和层析法纯化His 标记的融合蛋白 二、实验原理 将目的基因连接在表达载体后,通过加入诱导剂IPTG诱导目... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 心肌肌浆网钙-三磷酸腺苷酶的活性测定 心肌肌浆网钙-ATP酶(SERCA2a)在心肌细胞内的钙稳态调控中起主要作用,对SERCA2a在IPC过程中基因转录调控的研究有可能从基因表达调控层面揭示SERCA... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 原核蛋白表达载体的讨论 想和大家讨论讨论原核表达载体原核表达载体 ,如pet系列,型号从小到大,那么多,往往让新手选择起来不知所措。所以希望和大家讨论讨论到底他们是怎么演变的,每个的优缺点... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 检测蛋白磷酸化的六种方法及其优缺点 磷酸化评估蛋白激酶将磷酸基团从ATP转移到蛋白多肽底物上的丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基,直接影响目标的活性和功能。放射性研究表明,真核细胞中大约30%的蛋白经过磷酸化... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 磷酸化蛋白的免疫印迹检测经验总结 磷酸化蛋白的Western Blotting检测是信号通路研究中的经典方法。然而,有时会遇到一些问题,例如,磷酸化抗体检测不到总蛋白,不知道如何使用lysis bu... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 在大肠杆菌中高效表达外源蛋白的全攻略 蛋白表达技术全攻略本世纪60至70年代对大肠杆菌的研究使之成为自然界中最普遍为人们所认识的生物体。大肠杆菌具有两个显著特征:操作简单和能在廉价的培养基中高密度培养,... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 精氨酸的作用与副作用 精氨酸(arginine)是一种脂肪族的碱性的含有胍基的极性α氨基酸,在生理条件下带正电荷。L-精氨酸是蛋白质合成中的编码氨基酸,哺乳动物 必需氨基酸和生糖氨基酸。... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 蛋白不表达的原因知识汇总 做蛋白表达 实验的时候,有时候实验会觉得参考实验方法和克隆的蛋白基因序列完全没有问题,蛋白电泳就是没有结果。就个人经验总结和一些网络资源汇总了下蛋白不表达的原因。1... 05月08日 发表评论 阅读全文