1. 探针的标记：（1） 如下设置探针标记的反应体系：待标记探针 （1.75pmol/微升） 2微升T4 Polynucleotide Kinase Buffer ...
生物知识
生物知识
生物知识
百奇生物的Western-Blotting方法
1. 溶液准备：转印缓冲液：0.025M Tris base , 0.192 M甘氨酸 , 30%甲醇10×TBST:250mM Tris-HCl （ pH 8.0...
生物知识
Western Blot试剂的准备
1. 30%储备胶溶液： 丙烯酰胺（Acr） 29.0g 亚甲双丙烯酰胺（Bis） 1.0g 混匀后ddH2O，37℃溶解，定容至100ml，...
生物知识
Western Blot 常见问题分析
1. 在western实验中，通常有人采用TBS，有人采用PBS，在使用中有什么区别？答：选择合适的缓冲液对于维持一定PH值下蛋白质的稳定及保证实验的重复性是很重要...
生物知识
磷酸化蛋白的western blot之建议
1. 一定要在lysis buffer中加入蛋白酶抑制剂，还要加入一定量的磷酸酶抑制剂，否则即使band压出来也会很浅，结果也不可信。2. 加一抗后最好4℃过夜，保...
生物知识
western-blot实验方法
1、试剂耗材的准备：（1）转膜缓冲液（48 mM Tris-HCl，39 mM 甘氨酸，0.037% SDS，20%甲醇）：（2）10 × 丽春红染液：（3）TBS...
生物知识
凯氏（ Kjeldahl ）微量定氮法测定血清蛋白质含量
【原理】 凯氏定氮法是蛋白质含量测定的经典方法，它是根据蛋白质分子中含氮量来测定的，各种蛋白质含氮量比较近似，平均约为 16 ％，即 1g 氮相当于 6.25g 蛋...
生物知识
微量凯氏（Micro-Kjeldahl）定氮法测定蛋白质含量
【实验原理】 蛋白质（或其它含氮有机化合物）与浓H2SO4共热时，其中碳、氢两种元素被氧化成CO2和H2O，而氮元素转变成NH3，并进一步与H2SO4反应生成(NH...
生物知识
蛋白质的定量测定方法：微量凯氏定氮法
【 实验目的 】 学习凯氏定氮法的原理和操作技术。 【 实验原理 】 凯氏定氮法用于测定有机物的含氮量,若蛋白质的含氮量已知时，则可用此法测定样品中蛋白质的含量。 ...
生物知识
蛋白质单晶培养的15种方法
（1）大量养晶法（bulk crystallization）：若急着养出单晶，则将纯化之蛋白质溶液加入固体盐类或饱和盐液，直到溶液中出现乳白混浊色，离心后把上清液（...
