生物知识 变性梯度凝胶电泳(DGGE)实验操作技术方法与步骤 变性梯度凝胶电泳 主要分离原理是利用DNA链的熔解性质达到分离目的,低熔点和高熔点的DNA局部解链的程度不同,分子的迁移速率不通过,进而分离。一、实验原理变性梯度凝... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 SDS-PAGE蛋白质电泳常见问题分析 SDS-PAGE电泳主要利用聚丙烯酰胺 的分子筛效应分离蛋白质和核酸,SDS-PAG蛋白质电泳分析可从蛋白质亚基分子量的大小就分离蛋白质。几乎所有蛋白质电泳分析都在... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 RNA变性凝胶电泳技术方法 RNA电泳包括非变性和变性凝胶电泳 两种,非变性电泳可以分离不同分子量大小的RNA,由于RNA分子具有二级和三级结构,这些结构会影响电泳结果,所以分变性电泳无法确定... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 双向电泳溶液配制大全 A. 裂解液 (lysis solution) (8M Urea, 4%CHAPS, 2% Pharmalyte3-10, 40 ml)Final concentr... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 IEF/SDS-PAGE双向电泳 1975年O′Farrall等人根据不同组份之间的等电点差异和分子 量差异建立了IEF/SD S-PAGE双向电泳。其中IEF电泳(管柱状)为第... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 双向电泳各部分操作大全 1. 总的策略① 化学试剂纯度要高,至少是分析级,目前国产试剂达不到纯度要求 ② 使用去离子水(电导<2uS) ③ 尿素和丙烯酰胺/甲叉丙烯酰胺需新鲜配制 ④... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 双向电泳蛋白点的切取和保存及其注意事项 1. 用 PDQuest软件 或肉眼比对,找出感兴趣的蛋白点,并做好标记和记录。2. 用 MilliQ水冲洗胶 2 次。3. 用色谱纯甲醇和 MilliQ水冲洗 E... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 Native-PAGE常见问题及其解析锦集 1. 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 时预电泳是怎么回事的?预电泳时要加6×DNA上样缓冲液吗?电泳1-2小时再加结合反应产物吗?预电泳是除去凝胶中没有聚合的单体和双体和... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作方法 【材料与试剂】(1)2×SDS凝胶加样缓冲液(2)聚丙烯酰胺凝胶电泳槽和电泳仪(3)加样器和吸头等(4)水浴锅【操作方法】(1) 把上述处理的样品按1:1(V/V)... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 SDS-PAGE检测外源蛋白的表达实验操作步骤 [实验原理]SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS—PAGE)是蛋白分析中最经常使用的一种方法。它是将蛋白样品同离子型去垢剂十二烷基硫酸钠(SDS)以及巯基乙醇一起加... 05月09日 发表评论 阅读全文